工业微生物
工業微生物
공업미생물
INDUSTRIAL MICROBIOLOGY
2014年
2期
25-30
,共6页
郭玉婉%沈微%王一恬%樊游%陈献忠%王正祥
郭玉婉%瀋微%王一恬%樊遊%陳獻忠%王正祥
곽옥완%침미%왕일념%번유%진헌충%왕정상
扣囊复膜孢酵母%α-淀粉酶%乳酸克鲁维酵母%麦芽三糖
釦囊複膜孢酵母%α-澱粉酶%乳痠剋魯維酵母%麥芽三糖
구낭복막포효모%α-정분매%유산극로유효모%맥아삼당
Saccharomycopsis fibuligera%α-amylase%Kluyveromyces lactis%maltotriose
通过PCR方法从扣囊复膜孢酵母基因组DNA中克隆获得α-淀粉酶基因成熟肽编码区(SfA),插入乳酸克鲁维酵母表达载体pKLAC1的α因子信号肽下游,构建重组表达载体pKLAC1-SfA.重组载体转化乳酸克鲁维酵母GG799,筛选获得表达α-淀粉酶SfA水平较高的重组菌.酶活检测和SDS-PAGE电泳检测均显示,重组菌分泌重组酶SfA到发酵液中.酶学性质研究表明:SfA最适温度为45℃,最适pH 5.0,在pH4.5 ～5.5、50℃条件下保持稳定.Ca2+等二价金属离子对SfA酶活有激活作用,EDTA强烈的抑制SfA活性.HPLC分析显示SfA水解糊精获得麦芽寡糖和少量葡萄糖,其中麦芽三糖是主要产物,占水解产物总量的52％.
通過PCR方法從釦囊複膜孢酵母基因組DNA中剋隆穫得α-澱粉酶基因成熟肽編碼區(SfA),插入乳痠剋魯維酵母錶達載體pKLAC1的α因子信號肽下遊,構建重組錶達載體pKLAC1-SfA.重組載體轉化乳痠剋魯維酵母GG799,篩選穫得錶達α-澱粉酶SfA水平較高的重組菌.酶活檢測和SDS-PAGE電泳檢測均顯示,重組菌分泌重組酶SfA到髮酵液中.酶學性質研究錶明:SfA最適溫度為45℃,最適pH 5.0,在pH4.5 ～5.5、50℃條件下保持穩定.Ca2+等二價金屬離子對SfA酶活有激活作用,EDTA彊烈的抑製SfA活性.HPLC分析顯示SfA水解糊精穫得麥芽寡糖和少量葡萄糖,其中麥芽三糖是主要產物,佔水解產物總量的52％.
통과PCR방법종구낭복막포효모기인조DNA중극륭획득α-정분매기인성숙태편마구(SfA),삽입유산극로유효모표체재체pKLAC1적α인자신호태하유,구건중조표체재체pKLAC1-SfA.중조재체전화유산극로유효모GG799,사선획득표체α-정분매SfA수평교고적중조균.매활검측화SDS-PAGE전영검측균현시,중조균분비중조매SfA도발효액중.매학성질연구표명:SfA최괄온도위45℃,최괄pH 5.0,재pH4.5 ～5.5、50℃조건하보지은정.Ca2+등이개금속리자대SfA매활유격활작용,EDTA강렬적억제SfA활성.HPLC분석현시SfA수해호정획득맥아과당화소량포도당,기중맥아삼당시주요산물,점수해산물총량적52％.
