骨科
骨科
골과
ORTHOPAEDICS
2014年
2期
69-72
,共4页
吴颖星%杨卿%杨开祥%叶亚平%向威%郭风劲
吳穎星%楊卿%楊開祥%葉亞平%嚮威%郭風勁
오영성%양경%양개상%협아평%향위%곽풍경
NF-κB%RNA%间质干细胞%骨关节炎
NF-κB%RNA%間質榦細胞%骨關節炎
NF-κB%RNA%간질간세포%골관절염
目的 鉴定NF-κB/p65-shRNA质粒并转染入骨髓间充质干细胞,检测靶细胞在NF-κB通路激活时磷酸化NF-κB/p65的表达.方法 用双酶电泳鉴定所得质粒.使用HP试剂将NF-κWp65-shRNA质粒转染至小鼠BMSCs,在荧光显微镜下观察绿色荧光,并且以流式细胞术检测转染效率,最后以Western Blot检测转染后靶细胞在炎症环境下对磷酸化NF-κB/p65表达的抑制情况.结果 NF-κB/p65-shRNA质粒酶切鉴定结果与预期一致;流式细胞术检测转染效率达到52.76％;Western Blot检测在炎症环境刺激下,转染后靶细胞磷酸化NF-κB/p65表达明显降低.结论 成功将NF-κB/p65-shRNA质粒转染至BMSCs中并有效表达,为进一步实验通过BMSCs修复和重建骨关节炎患者的软骨组织奠定基础.
目的 鑒定NF-κB/p65-shRNA質粒併轉染入骨髓間充質榦細胞,檢測靶細胞在NF-κB通路激活時燐痠化NF-κB/p65的錶達.方法 用雙酶電泳鑒定所得質粒.使用HP試劑將NF-κWp65-shRNA質粒轉染至小鼠BMSCs,在熒光顯微鏡下觀察綠色熒光,併且以流式細胞術檢測轉染效率,最後以Western Blot檢測轉染後靶細胞在炎癥環境下對燐痠化NF-κB/p65錶達的抑製情況.結果 NF-κB/p65-shRNA質粒酶切鑒定結果與預期一緻;流式細胞術檢測轉染效率達到52.76％;Western Blot檢測在炎癥環境刺激下,轉染後靶細胞燐痠化NF-κB/p65錶達明顯降低.結論 成功將NF-κB/p65-shRNA質粒轉染至BMSCs中併有效錶達,為進一步實驗通過BMSCs脩複和重建骨關節炎患者的軟骨組織奠定基礎.
목적 감정NF-κB/p65-shRNA질립병전염입골수간충질간세포,검측파세포재NF-κB통로격활시린산화NF-κB/p65적표체.방법 용쌍매전영감정소득질립.사용HP시제장NF-κWp65-shRNA질립전염지소서BMSCs,재형광현미경하관찰록색형광,병차이류식세포술검측전염효솔,최후이Western Blot검측전염후파세포재염증배경하대린산화NF-κB/p65표체적억제정황.결과 NF-κB/p65-shRNA질립매절감정결과여예기일치;류식세포술검측전염효솔체도52.76％;Western Blot검측재염증배경자격하,전염후파세포린산화NF-κB/p65표체명현강저.결론 성공장NF-κB/p65-shRNA질립전염지BMSCs중병유효표체,위진일보실험통과BMSCs수복화중건골관절염환자적연골조직전정기출.
