胃肠病学和肝病学杂志
胃腸病學和肝病學雜誌
위장병학화간병학잡지
CHINESE JOURNAL OF GASTROENTEROLOGY AND HEPATOLOGY
2014年
5期
481-485
,共5页
肝癌%肿瘤相关糖蛋白-72%T细胞
肝癌%腫瘤相關糖蛋白-72%T細胞
간암%종류상관당단백-72%T세포
Hepatocellular cancer%Tumor associated glycoprotein-72%T lymphocytes
目的 制备肿瘤相关糖蛋白-72(TAG-72)嵌合锚定T细胞,体内外实验检测其对肝癌的抑癌活性.方法 分离健康人外周血单个核细胞(PBMC),采用脂质体lipofectamineTM 2000介导的细胞转染,将已制备的重组真核表达载体抗TAG-72 scFv-CD3ξ-pcDNA3.0导入PBMC,获得肿瘤相关糖蛋白-72(TAG-72)嵌合锚定T细胞,以此为实验组治疗细胞;用SDS-PAGE检测TAG-72嵌合锚定T细胞中抗TAG-72 scFv-CD3ξ嵌合分子的表达,并用Western blotting证实.用转染空载体pcDNA3.0的PBMC作为对照组治疗细胞.将实验组及对照组的治疗细胞分别经尾静脉注射治疗荷TAG-72+肝癌细胞HepG2、荷TAG-72肝癌细胞BEL7402裸鼠动物模型,观察对裸鼠的抑癌效应.结果 SDS-PAGE检测TAG-72嵌合锚定T细胞嵌合分子抗TAG-72 seFv-CD3ξ的表达,显示大小为47 kDa的融合蛋白片段,与抗TAG-72 scFv-CD3ξ的理论值相符;Western blotting证实该片段CD3呈阳性表达.TAG-72嵌合锚定T细胞与肝癌细胞HepG2共培养后可对后者产生G1期阻滞.用TAG-72嵌合锚定T细胞经尾静脉注射治疗荷瘤裸鼠,发现实验组细胞对荷HepG2细胞裸鼠存活时间、体质量、肿瘤包块大小等方面疗效优于荷BEL7402细胞裸鼠的疗效,两者比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 TAG-72嵌合锚定T细胞可特异性抑制荷TAG-72+肝癌细胞裸鼠的肝癌细胞生长;该治疗策略将为肝癌的临床诊治提供一种有希望的途径.
目的 製備腫瘤相關糖蛋白-72(TAG-72)嵌閤錨定T細胞,體內外實驗檢測其對肝癌的抑癌活性.方法 分離健康人外週血單箇覈細胞(PBMC),採用脂質體lipofectamineTM 2000介導的細胞轉染,將已製備的重組真覈錶達載體抗TAG-72 scFv-CD3ξ-pcDNA3.0導入PBMC,穫得腫瘤相關糖蛋白-72(TAG-72)嵌閤錨定T細胞,以此為實驗組治療細胞;用SDS-PAGE檢測TAG-72嵌閤錨定T細胞中抗TAG-72 scFv-CD3ξ嵌閤分子的錶達,併用Western blotting證實.用轉染空載體pcDNA3.0的PBMC作為對照組治療細胞.將實驗組及對照組的治療細胞分彆經尾靜脈註射治療荷TAG-72+肝癌細胞HepG2、荷TAG-72肝癌細胞BEL7402裸鼠動物模型,觀察對裸鼠的抑癌效應.結果 SDS-PAGE檢測TAG-72嵌閤錨定T細胞嵌閤分子抗TAG-72 seFv-CD3ξ的錶達,顯示大小為47 kDa的融閤蛋白片段,與抗TAG-72 scFv-CD3ξ的理論值相符;Western blotting證實該片段CD3呈暘性錶達.TAG-72嵌閤錨定T細胞與肝癌細胞HepG2共培養後可對後者產生G1期阻滯.用TAG-72嵌閤錨定T細胞經尾靜脈註射治療荷瘤裸鼠,髮現實驗組細胞對荷HepG2細胞裸鼠存活時間、體質量、腫瘤包塊大小等方麵療效優于荷BEL7402細胞裸鼠的療效,兩者比較差異有統計學意義(P＜0.05).結論 TAG-72嵌閤錨定T細胞可特異性抑製荷TAG-72+肝癌細胞裸鼠的肝癌細胞生長;該治療策略將為肝癌的臨床診治提供一種有希望的途徑.
목적 제비종류상관당단백-72(TAG-72)감합묘정T세포,체내외실험검측기대간암적억암활성.방법 분리건강인외주혈단개핵세포(PBMC),채용지질체lipofectamineTM 2000개도적세포전염,장이제비적중조진핵표체재체항TAG-72 scFv-CD3ξ-pcDNA3.0도입PBMC,획득종류상관당단백-72(TAG-72)감합묘정T세포,이차위실험조치료세포;용SDS-PAGE검측TAG-72감합묘정T세포중항TAG-72 scFv-CD3ξ감합분자적표체,병용Western blotting증실.용전염공재체pcDNA3.0적PBMC작위대조조치료세포.장실험조급대조조적치료세포분별경미정맥주사치료하TAG-72+간암세포HepG2、하TAG-72간암세포BEL7402라서동물모형,관찰대라서적억암효응.결과 SDS-PAGE검측TAG-72감합묘정T세포감합분자항TAG-72 seFv-CD3ξ적표체,현시대소위47 kDa적융합단백편단,여항TAG-72 scFv-CD3ξ적이론치상부;Western blotting증실해편단CD3정양성표체.TAG-72감합묘정T세포여간암세포HepG2공배양후가대후자산생G1기조체.용TAG-72감합묘정T세포경미정맥주사치료하류라서,발현실험조세포대하HepG2세포라서존활시간、체질량、종류포괴대소등방면료효우우하BEL7402세포라서적료효,량자비교차이유통계학의의(P＜0.05).결론 TAG-72감합묘정T세포가특이성억제하TAG-72+간암세포라서적간암세포생장;해치료책략장위간암적림상진치제공일충유희망적도경.
