井冈山大学学报（自然科学版）
井岡山大學學報（自然科學版）
정강산대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF JINGGANGSHAN UNIVERSITY(SCIENCE AND TECHNOLOGY)
2014年
3期
42-45
,共4页
β-葡萄糖苷酶%克隆%酶活
β-葡萄糖苷酶%剋隆%酶活
β-포도당감매%극륭%매활
β-glueosidase%cloning%activity of enzyme
β-葡萄糖苷酶(Ec3.2.1.21)属于糖苷水解酶家族3，它能够水解非还原性末端的β-D葡萄糖苷键，释放出游离的葡萄糖及相应的配基。β-葡萄糖苷酶是纤维素降解中的关键酶，对于可再生资源纤维素的利用具有十分重要的意义。本研究从水稻土壤中分离得到β-葡萄糖苷酶基因pds5，将其克隆到表达载体pET32a(+)中，转化BL21大肠杆菌中，并诱导表达该基因。重组BL21大肠杆菌用IPTG诱导后，所提取的酶蛋白具有β-葡萄糖苷酶的活性，经SDS-PAGE分析，确定其相对分子质量为83 kD。通过控制pH和温度的方法，测得该酶酶活最适pH为7.0，最适温度为37.5℃。
β-葡萄糖苷酶(Ec3.2.1.21)屬于糖苷水解酶傢族3，它能夠水解非還原性末耑的β-D葡萄糖苷鍵，釋放齣遊離的葡萄糖及相應的配基。β-葡萄糖苷酶是纖維素降解中的關鍵酶，對于可再生資源纖維素的利用具有十分重要的意義。本研究從水稻土壤中分離得到β-葡萄糖苷酶基因pds5，將其剋隆到錶達載體pET32a(+)中，轉化BL21大腸桿菌中，併誘導錶達該基因。重組BL21大腸桿菌用IPTG誘導後，所提取的酶蛋白具有β-葡萄糖苷酶的活性，經SDS-PAGE分析，確定其相對分子質量為83 kD。通過控製pH和溫度的方法，測得該酶酶活最適pH為7.0，最適溫度為37.5℃。
β-포도당감매(Ec3.2.1.21)속우당감수해매가족3，타능구수해비환원성말단적β-D포도당감건，석방출유리적포도당급상응적배기。β-포도당감매시섬유소강해중적관건매，대우가재생자원섬유소적이용구유십분중요적의의。본연구종수도토양중분리득도β-포도당감매기인pds5，장기극륭도표체재체pET32a(+)중，전화BL21대장간균중，병유도표체해기인。중조BL21대장간균용IPTG유도후，소제취적매단백구유β-포도당감매적활성，경SDS-PAGE분석，학정기상대분자질량위83 kD。통과공제pH화온도적방법，측득해매매활최괄pH위7.0，최괄온도위37.5℃。
β-glueosidase (EC3.2.l.21) belongs to glycoside hydrolases superfamily 3, which could hydrolyzeβ-D-glueosidie bond and release glueose and corresponding aglueone. β-glueosidase is the key enzyme in cellulose degradation. The β-glucosidase gene was cloned into pET32a (+) and then build upon an expression carrier in BL21Escherichia coli, and induces the expression of the gene. BL21 recombinantE. coli induced by IPTG, the relative molecular mass of the extracted protein with β-glucosidase activity analyzed by SDS-PAGE analysis is 83kD. Through the control of pH and temperature, the optimum pH of the enzyme activity is 7, the optimum temperature is 37.5℃.
