四川医学
四川醫學
사천의학
SICHUAN MEDICAL JOURNAL
2008年
7期
802-804
,共3页
谭晓秋%白志茹%丁银元%杨艳%刘智飞%黄文俊%曾晓荣
譚曉鞦%白誌茹%丁銀元%楊豔%劉智飛%黃文俊%曾曉榮
담효추%백지여%정은원%양염%류지비%황문준%증효영
KChIP2基因%SK2基因%心肌细胞%实时荧光定量PCR
KChIP2基因%SK2基因%心肌細胞%實時熒光定量PCR
KChIP2기인%SK2기인%심기세포%실시형광정량PCR
目的 检测人心房肌KChIP2和SK2基因表达,并构建相应质粒标准品,为进一步研究基因功能奠定基础.方法 提取人心房肌组织总RNA,采用RT-PCR方法获取KChIP2、SK2、GAPDH、β-actin目的 片段,与pMD-18T vector连接成重组质粒,转化到大肠杆菌DH5α中,通过PCR和测序鉴定.提取含目的 基因的质粒作为标准品.采用Taqman探针法与SYBR Green Ⅰ法分别检测人心房肌SK2与KChIP2基因表达和构建标准曲线.结果 人心房肌存在KChIP2和SK2基因表达.质粒标准品经过PCR鉴定并测序.与Pubmed数据库完全一致,标准曲线线性关系好,相关系数R2>0.99.结论 成功检测人心房肌KChIP2和SK2基因表达,构建的质粒标准品能用于后续实验.
目的 檢測人心房肌KChIP2和SK2基因錶達,併構建相應質粒標準品,為進一步研究基因功能奠定基礎.方法 提取人心房肌組織總RNA,採用RT-PCR方法穫取KChIP2、SK2、GAPDH、β-actin目的 片段,與pMD-18T vector連接成重組質粒,轉化到大腸桿菌DH5α中,通過PCR和測序鑒定.提取含目的 基因的質粒作為標準品.採用Taqman探針法與SYBR Green Ⅰ法分彆檢測人心房肌SK2與KChIP2基因錶達和構建標準麯線.結果 人心房肌存在KChIP2和SK2基因錶達.質粒標準品經過PCR鑒定併測序.與Pubmed數據庫完全一緻,標準麯線線性關繫好,相關繫數R2>0.99.結論 成功檢測人心房肌KChIP2和SK2基因錶達,構建的質粒標準品能用于後續實驗.
목적 검측인심방기KChIP2화SK2기인표체,병구건상응질립표준품,위진일보연구기인공능전정기출.방법 제취인심방기조직총RNA,채용RT-PCR방법획취KChIP2、SK2、GAPDH、β-actin목적 편단,여pMD-18T vector련접성중조질립,전화도대장간균DH5α중,통과PCR화측서감정.제취함목적 기인적질립작위표준품.채용Taqman탐침법여SYBR Green Ⅰ법분별검측인심방기SK2여KChIP2기인표체화구건표준곡선.결과 인심방기존재KChIP2화SK2기인표체.질립표준품경과PCR감정병측서.여Pubmed수거고완전일치,표준곡선선성관계호,상관계수R2>0.99.결론 성공검측인심방기KChIP2화SK2기인표체,구건적질립표준품능용우후속실험.
