CAJ | 학술논문

背景:目前国内骨髓库主要采用分辨率较高的聚合酶链反应-寡核苷酸探针分型反向杂交荧光微珠法,该方法在提高分辨率的同时,使部分隐藏新基因的标本的检测结果表现为摸棱两可,对该可疑标本进行确认最简便的方法是DNA测序HLA分型检测.目的:应用DNA测序方法确认HLA-DRB1位点1个新等位基因.设计、时间及地点:常规初检于2005-11在河南血液中心中国骨髓库河南分库HLA组织配型实验室完成.测序实验于2006-04在美国海军骨髓库HLA实验室完成.材料:中国造血干细胞捐献者初检结果可疑为新基因的重采血样5 mL.方法:采用聚合酶链反应-寡核苷酸探针分型流式微珠杂交技术对中华造血干细胞捐献者进行HLA中低分型检测,对可疑为新等位基因的样本进行DNA测序分析,通过EBI(http://www.ebi.ac.uk/)和NCBI(hap:Hwww.ncbi.nlm.nih.gov/)将测序结果与已知的人类白细胞抗原(human leukoyte antigen,HLA)等位基因序列进行比较分析,以确认是否为新的基因序列.主要观察指标:测序结果与已知HLA等位基因序列的比较分析.结果:样本HLA-DRB1位点中低分型结果的初检、复检反应格局与分析软件数据库中HLA-DRB1等位基因的模板谱型均不匹配.样本DRB1*11XX第2外显子序列与所有已知等位基因序列均不一致,与DRB1*110401的同源性高达99%,外显子2区域中的308位碱基发生了C>A碱基替代,并导致了相应氨基酸丙氨酸>谷氨酸的改变.结论:该等位基因为HLA-DRB1*11组中的1个新等位基因,2006-07被WHO的HLA因子命名委员会正式命名为HLA-DRB1*115402.
배경:목전국내골수고주요채용분변솔교고적취합매련반응-과핵감산탐침분형반향잡교형광미주법,해방법재제고분변솔적동시,사부분은장신기인적표본적검측결과표현위모릉량가,대해가의표본진행학인최간편적방법시DNA측서HLA분형검측.목적:응용DNA측서방법학인HLA-DRB1위점1개신등위기인.설계、시간급지점:상규초검우2005-11재하남혈액중심중국골수고하남분고HLA조직배형실험실완성.측서실험우2006-04재미국해군골수고HLA실험실완성.재료:중국조혈간세포연헌자초검결과가의위신기인적중채혈양5 mL.방법:채용취합매련반응-과핵감산탐침분형류식미주잡교기술대중화조혈간세포연헌자진행HLA중저분형검측,대가의위신등위기인적양본진행DNA측서분석,통과EBI(http://www.ebi.ac.uk/)화NCBI(hap:Hwww.ncbi.nlm.nih.gov/)장측서결과여이지적인류백세포항원(human leukoyte antigen,HLA)등위기인서렬진행비교분석,이학인시부위신적기인서렬.주요관찰지표:측서결과여이지HLA등위기인서렬적비교분석.결과:양본HLA-DRB1위점중저분형결과적초검、복검반응격국여분석연건수거고중HLA-DRB1등위기인적모판보형균불필배.양본DRB1*11XX제2외현자서렬여소유이지등위기인서렬균불일치,여DRB1*110401적동원성고체99%,외현자2구역중적308위감기발생료C>A감기체대,병도치료상응안기산병안산>곡안산적개변.결론:해등위기인위HLA-DRB1*11조중적1개신등위기인,2006-07피WHO적HLA인자명명위원회정식명명위HLA-DRB1*115402.