中草药
中草藥
중초약
CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
2008年
8期
1227-1230
,共4页
吕杰%金湘%毛培宏%凌海秋%樊永红%武宝山%欧阳平凯
呂傑%金湘%毛培宏%凌海鞦%樊永紅%武寶山%歐暘平凱
려걸%금상%모배굉%릉해추%번영홍%무보산%구양평개
氮离子注入%麻黄基因组DNA%重组酵母%麻黄碱
氮離子註入%痳黃基因組DNA%重組酵母%痳黃堿
담리자주입%마황기인조DNA%중조효모%마황감
目的 以麻黄碱为目标产物,探讨氮离子(N+)注入介导麻黄基因组DNA在酵母菌中的转化.方法 通过N+注入介导蓝麻黄基因组DNA分别在酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae和异常汉逊酵母Hamenula anomala中随机转化,转化后的酵母菌经BTB指示性辅助筛选、斜面传代和液体培养后,用铜铬盐定性检识和RP-HPLC方法,检测重组酵母菌胞外和胞内麻黄碱的量.结果 获得了遗传稳定的以葡萄糖为碳源、NaNO3为氮源生物合成麻黄碱和(或)伪麻黄碱的重组酵母菌9株.液体培养72 h,RP-HPLC测试胞外麻黄碱和伪麻黄碱的最高量分别为18.85和2.88 mg/L;胞内麻黄碱和伪麻黄碱最高量分别为4.29和22.16 mg/g干细胞.结论 采用离子注入介导麻黄基因组DNA大分子转化技术,通过适当的筛选方法,可获得易于人工培养的产生麻黄碱等次生代谢产物的微生物工程菌株.
目的 以痳黃堿為目標產物,探討氮離子(N+)註入介導痳黃基因組DNA在酵母菌中的轉化.方法 通過N+註入介導藍痳黃基因組DNA分彆在釀酒酵母Saccharomyces cerevisiae和異常漢遜酵母Hamenula anomala中隨機轉化,轉化後的酵母菌經BTB指示性輔助篩選、斜麵傳代和液體培養後,用銅鉻鹽定性檢識和RP-HPLC方法,檢測重組酵母菌胞外和胞內痳黃堿的量.結果 穫得瞭遺傳穩定的以葡萄糖為碳源、NaNO3為氮源生物閤成痳黃堿和(或)偽痳黃堿的重組酵母菌9株.液體培養72 h,RP-HPLC測試胞外痳黃堿和偽痳黃堿的最高量分彆為18.85和2.88 mg/L;胞內痳黃堿和偽痳黃堿最高量分彆為4.29和22.16 mg/g榦細胞.結論 採用離子註入介導痳黃基因組DNA大分子轉化技術,通過適噹的篩選方法,可穫得易于人工培養的產生痳黃堿等次生代謝產物的微生物工程菌株.
목적 이마황감위목표산물,탐토담리자(N+)주입개도마황기인조DNA재효모균중적전화.방법 통과N+주입개도람마황기인조DNA분별재양주효모Saccharomyces cerevisiae화이상한손효모Hamenula anomala중수궤전화,전화후적효모균경BTB지시성보조사선、사면전대화액체배양후,용동락염정성검식화RP-HPLC방법,검측중조효모균포외화포내마황감적량.결과 획득료유전은정적이포도당위탄원、NaNO3위담원생물합성마황감화(혹)위마황감적중조효모균9주.액체배양72 h,RP-HPLC측시포외마황감화위마황감적최고량분별위18.85화2.88 mg/L;포내마황감화위마황감최고량분별위4.29화22.16 mg/g간세포.결론 채용리자주입개도마황기인조DNA대분자전화기술,통과괄당적사선방법,가획득역우인공배양적산생마황감등차생대사산물적미생물공정균주.
