南方农业学报
南方農業學報
남방농업학보
GUANGXI AGRICULTURAL SCIENCES
2012年
10期
1443-1446
,共4页
陈臣%任婧%艾连中%刘振民
陳臣%任婧%艾連中%劉振民
진신%임청%애련중%류진민
益生菌%植物乳杆菌ST-Ⅲ%PCR%Real-time PCR%定性定量检测
益生菌%植物乳桿菌ST-Ⅲ%PCR%Real-time PCR%定性定量檢測
익생균%식물유간균ST-Ⅲ%PCR%Real-time PCR%정성정량검측
[目的]建立快速定性、定量检测益生菌产品中植物乳杆菌菌株ST-Ⅲ的方法,为其实际应用提供参考.[方法]根据植物乳杆菌菌株ST-Ⅲ与NCBI库中3株已知序列的植物乳杆菌全基因组序列差异,设计菌株特异性引物,进行菌株特异性PCR验证和定性检测;然后建立荧光定量PCR,并检测益生菌制品中菌株ST-Ⅲ含量.[结果]设计的引物具有良好的菌株特异性;经PCR扩增,含有ST-Ⅲ的检验样本出现预期特征条带,与预期目的片段(242 bp)相近.建立的荧光定量PCR标准曲线方程为y=-3.3691gx+39.84,R2为0.9990,符合Real-time PCR定量的要求,其检测限为2.85×l03CFU/mL.经检测,样品中植物乳杆菌ST-Ⅲ的数量分别为3.25×105、1.28×106、4.55X106 CFU/mL.[结论]建立的植物乳杆菌菌株ST-Ⅲ定性、定量检测方法快速灵敏、测定时间短,可以在实际生产中应用.
[目的]建立快速定性、定量檢測益生菌產品中植物乳桿菌菌株ST-Ⅲ的方法,為其實際應用提供參攷.[方法]根據植物乳桿菌菌株ST-Ⅲ與NCBI庫中3株已知序列的植物乳桿菌全基因組序列差異,設計菌株特異性引物,進行菌株特異性PCR驗證和定性檢測;然後建立熒光定量PCR,併檢測益生菌製品中菌株ST-Ⅲ含量.[結果]設計的引物具有良好的菌株特異性;經PCR擴增,含有ST-Ⅲ的檢驗樣本齣現預期特徵條帶,與預期目的片段(242 bp)相近.建立的熒光定量PCR標準麯線方程為y=-3.3691gx+39.84,R2為0.9990,符閤Real-time PCR定量的要求,其檢測限為2.85×l03CFU/mL.經檢測,樣品中植物乳桿菌ST-Ⅲ的數量分彆為3.25×105、1.28×106、4.55X106 CFU/mL.[結論]建立的植物乳桿菌菌株ST-Ⅲ定性、定量檢測方法快速靈敏、測定時間短,可以在實際生產中應用.
[목적]건립쾌속정성、정량검측익생균산품중식물유간균균주ST-Ⅲ적방법,위기실제응용제공삼고.[방법]근거식물유간균균주ST-Ⅲ여NCBI고중3주이지서렬적식물유간균전기인조서렬차이,설계균주특이성인물,진행균주특이성PCR험증화정성검측;연후건립형광정량PCR,병검측익생균제품중균주ST-Ⅲ함량.[결과]설계적인물구유량호적균주특이성;경PCR확증,함유ST-Ⅲ적검험양본출현예기특정조대,여예기목적편단(242 bp)상근.건립적형광정량PCR표준곡선방정위y=-3.3691gx+39.84,R2위0.9990,부합Real-time PCR정량적요구,기검측한위2.85×l03CFU/mL.경검측,양품중식물유간균ST-Ⅲ적수량분별위3.25×105、1.28×106、4.55X106 CFU/mL.[결론]건립적식물유간균균주ST-Ⅲ정성、정량검측방법쾌속령민、측정시간단,가이재실제생산중응용.
