中国动物传染病学报
中國動物傳染病學報
중국동물전염병학보
CHINESE JOURNAL OF VETERINARY PARASITOLOGY
2009年
2期
1-7
,共7页
陈柳%刘光清%倪征%余斌%云涛%华炯钢%李双茂
陳柳%劉光清%倪徵%餘斌%雲濤%華炯鋼%李雙茂
진류%류광청%예정%여빈%운도%화형강%리쌍무
兔出血症病毒%VP2%次要结构蛋白%细胞内定位
兔齣血癥病毒%VP2%次要結構蛋白%細胞內定位
토출혈증병독%VP2%차요결구단백%세포내정위
病毒蛋白VP2是兔出血症病毒(Rabbit Hemorrhagic Disease Virus,RHDV)的一种次要结构蛋白.本文旨在构建VP2与绿色荧光蛋白融合的真核表达载体,进而利用它研究VP2在细胞内的定位情况.首先在大肠杆菌中表达GST-VP2融合蛋白,然后用纯化的重组蛋白免疫小鼠制备抗VP2的抗血清.对制备的抗VP2抗血清进行特异性分析,再利用该抗体对转染pEGFP-VP2的BHK-21细胞进行检测,以研究VP2蛋白在细胞内的定位情况.结果表明,pEGFP-VF2转染BHK-21细胞后,不仅VP2蛋白得到了成功表达,而且通过检测偶联的绿色荧光蛋白可判断出VP2蛋白主要分布于BHK-21细胞的细胞质.本研究成功构建了VP2与绿色荧光蛋白融合的表达载体,并在真核细胞内实现了表达,通过检测荧光蛋白,发现VP2主要在细胞质内表达并分布,为深入探讨VP2的生物学功能奠定了基础.
病毒蛋白VP2是兔齣血癥病毒(Rabbit Hemorrhagic Disease Virus,RHDV)的一種次要結構蛋白.本文旨在構建VP2與綠色熒光蛋白融閤的真覈錶達載體,進而利用它研究VP2在細胞內的定位情況.首先在大腸桿菌中錶達GST-VP2融閤蛋白,然後用純化的重組蛋白免疫小鼠製備抗VP2的抗血清.對製備的抗VP2抗血清進行特異性分析,再利用該抗體對轉染pEGFP-VP2的BHK-21細胞進行檢測,以研究VP2蛋白在細胞內的定位情況.結果錶明,pEGFP-VF2轉染BHK-21細胞後,不僅VP2蛋白得到瞭成功錶達,而且通過檢測偶聯的綠色熒光蛋白可判斷齣VP2蛋白主要分佈于BHK-21細胞的細胞質.本研究成功構建瞭VP2與綠色熒光蛋白融閤的錶達載體,併在真覈細胞內實現瞭錶達,通過檢測熒光蛋白,髮現VP2主要在細胞質內錶達併分佈,為深入探討VP2的生物學功能奠定瞭基礎.
병독단백VP2시토출혈증병독(Rabbit Hemorrhagic Disease Virus,RHDV)적일충차요결구단백.본문지재구건VP2여록색형광단백융합적진핵표체재체,진이이용타연구VP2재세포내적정위정황.수선재대장간균중표체GST-VP2융합단백,연후용순화적중조단백면역소서제비항VP2적항혈청.대제비적항VP2항혈청진행특이성분석,재이용해항체대전염pEGFP-VP2적BHK-21세포진행검측,이연구VP2단백재세포내적정위정황.결과표명,pEGFP-VF2전염BHK-21세포후,불부VP2단백득도료성공표체,이차통과검측우련적록색형광단백가판단출VP2단백주요분포우BHK-21세포적세포질.본연구성공구건료VP2여록색형광단백융합적표체재체,병재진핵세포내실현료표체,통과검측형광단백,발현VP2주요재세포질내표체병분포,위심입탐토VP2적생물학공능전정료기출.
