实用儿科临床杂志
實用兒科臨床雜誌
실용인과림상잡지
Journal of Applied Clinical Pediatrics
2008年
14期
1101-1103
,共3页
神经干细胞%神经元%脑源性神经营养因子%分化
神經榦細胞%神經元%腦源性神經營養因子%分化
신경간세포%신경원%뇌원성신경영양인자%분화
目的 探讨脑源件神经营养因子(BDNF)对新生大鼠海马神经干细胞(NSCs)定向分化的影响.寻找新的NSCs诱导剂,以提高向神经元方向分化比例.方法 取1日龄新生大鼠海马组织,采用无血清培养液悬浮培养方法 进行培养,传2代后可得到高纯度NSCs.通过NSCs特殊标志物神经巢蛋白(nestin)染色鉴定培养细胞.将传3代的NSCs随即分为2组,每组15份.每份均为2mL.含细胞数为1×105.实验组用基础培养液加入50 g/L胎牛血清和20μg/L BDNF诱导其分化;对照组用基础培养液加入50 g/L胎牛血清.分化培养1周后用免疫荧光标记及流式细胞术检测其分化得到的神经元及其比例.结果 通过无血清悬浮培养海马组织细胞呈球形生长,nestin免疫荧光染色呈强阳性表达,细胞纯度90%;免疫荧光标记及流式细胞仪检测,实验组NSE阳性细胞的百分比为60.45%,明显高于对照组(23.67%)(x2=27.75 P<0.005).结论 通过无血清悬浮培养法培养新生大鼠海马组织细胞可获得纯度较高的NSCs;BDNF可体外诱导海马NSCs向神经元定向分化,并提高其分化比例;BDNF是一种较为理想的NSCs分化诱导剂.
目的 探討腦源件神經營養因子(BDNF)對新生大鼠海馬神經榦細胞(NSCs)定嚮分化的影響.尋找新的NSCs誘導劑,以提高嚮神經元方嚮分化比例.方法 取1日齡新生大鼠海馬組織,採用無血清培養液懸浮培養方法 進行培養,傳2代後可得到高純度NSCs.通過NSCs特殊標誌物神經巢蛋白(nestin)染色鑒定培養細胞.將傳3代的NSCs隨即分為2組,每組15份.每份均為2mL.含細胞數為1×105.實驗組用基礎培養液加入50 g/L胎牛血清和20μg/L BDNF誘導其分化;對照組用基礎培養液加入50 g/L胎牛血清.分化培養1週後用免疫熒光標記及流式細胞術檢測其分化得到的神經元及其比例.結果 通過無血清懸浮培養海馬組織細胞呈毬形生長,nestin免疫熒光染色呈彊暘性錶達,細胞純度90%;免疫熒光標記及流式細胞儀檢測,實驗組NSE暘性細胞的百分比為60.45%,明顯高于對照組(23.67%)(x2=27.75 P<0.005).結論 通過無血清懸浮培養法培養新生大鼠海馬組織細胞可穫得純度較高的NSCs;BDNF可體外誘導海馬NSCs嚮神經元定嚮分化,併提高其分化比例;BDNF是一種較為理想的NSCs分化誘導劑.
목적 탐토뇌원건신경영양인자(BDNF)대신생대서해마신경간세포(NSCs)정향분화적영향.심조신적NSCs유도제,이제고향신경원방향분화비례.방법 취1일령신생대서해마조직,채용무혈청배양액현부배양방법 진행배양,전2대후가득도고순도NSCs.통과NSCs특수표지물신경소단백(nestin)염색감정배양세포.장전3대적NSCs수즉분위2조,매조15빈.매빈균위2mL.함세포수위1×105.실험조용기출배양액가입50 g/L태우혈청화20μg/L BDNF유도기분화;대조조용기출배양액가입50 g/L태우혈청.분화배양1주후용면역형광표기급류식세포술검측기분화득도적신경원급기비례.결과 통과무혈청현부배양해마조직세포정구형생장,nestin면역형광염색정강양성표체,세포순도90%;면역형광표기급류식세포의검측,실험조NSE양성세포적백분비위60.45%,명현고우대조조(23.67%)(x2=27.75 P<0.005).결론 통과무혈청현부배양법배양신생대서해마조직세포가획득순도교고적NSCs;BDNF가체외유도해마NSCs향신경원정향분화,병제고기분화비례;BDNF시일충교위이상적NSCs분화유도제.
