中国实验血液学杂志
中國實驗血液學雜誌
중국실험혈액학잡지
JOURNAL OF EXPERIMENTAL HEMATOLOGY
2008年
4期
855-858
,共4页
陈惠芹%张绪超%黄绍良%蔡耘%吴北燕%周敦华%黄科
陳惠芹%張緒超%黃紹良%蔡耘%吳北燕%週敦華%黃科
진혜근%장서초%황소량%채운%오북연%주돈화%황과
胚胎干细胞%拟胚体%细胞分化%BMP-4%VEGF
胚胎榦細胞%擬胚體%細胞分化%BMP-4%VEGF
배태간세포%의배체%세포분화%BMP-4%VEGF
本研究旨在探讨骨形态发生蛋白4(BMP-4)和血管内皮生长因子(VEGF)在诱导胚胎干细胞(ESC)形成拟胚体(EB)过程中促进原始造血干细胞形成的作用.将小鼠E14 ESC在半固体培养基中诱导为EB,根据培养体系中有无添加因子分组:未添加因子的自然分化组、含不同浓度(5、15、25、50 ng/ml)的BMP-4组,在BMP-4单因子实验的基础上联合10 ng/ml VEGF组及单因子VEGF组.分别于3、6、9、12、15天时收获EB,用流式细胞术检测Flk-1+细胞含量.结果表明:随着添加BMP-4因子浓度的逐渐升高,EB中Flk-1+细胞形成比例也逐渐增加,在第3天(D3)和第6天(D6)两个时点,25 ng/ml BMP-4作用组Flk-1+细胞达到峰值,分别为(6.51±1.02)%和(7.70±1.12)%,与无BMP-4对照组及5 ng/ml组比较有统计学意义的差异(p＜0.05).然而在BMP-4浓度升高至50ns/ml条件下Flk-1+细胞形成比例有减少趋势.在BMP-4单因子实验的基础上,以25 ng/ml BMP-4联合10 ng/ml VEGF共同作用于ESC→EB诱导过程,Flk-1+细胞百分比明显提高,在9天达到峰值,为(27.53±8.14)%,与自发分化组[(8.77±2.35)%]及VEGF单因子组[(11.21±2.23)%]相比均有显著性差异(p＜0.05).结论:BMP-4和VEGF联合使用可促进EB中胚层原始造血干细胞的形成,为进一步模拟造血微环境定向诱导ESC造血分化提供了实验依据.
本研究旨在探討骨形態髮生蛋白4(BMP-4)和血管內皮生長因子(VEGF)在誘導胚胎榦細胞(ESC)形成擬胚體(EB)過程中促進原始造血榦細胞形成的作用.將小鼠E14 ESC在半固體培養基中誘導為EB,根據培養體繫中有無添加因子分組:未添加因子的自然分化組、含不同濃度(5、15、25、50 ng/ml)的BMP-4組,在BMP-4單因子實驗的基礎上聯閤10 ng/ml VEGF組及單因子VEGF組.分彆于3、6、9、12、15天時收穫EB,用流式細胞術檢測Flk-1+細胞含量.結果錶明:隨著添加BMP-4因子濃度的逐漸升高,EB中Flk-1+細胞形成比例也逐漸增加,在第3天(D3)和第6天(D6)兩箇時點,25 ng/ml BMP-4作用組Flk-1+細胞達到峰值,分彆為(6.51±1.02)%和(7.70±1.12)%,與無BMP-4對照組及5 ng/ml組比較有統計學意義的差異(p＜0.05).然而在BMP-4濃度升高至50ns/ml條件下Flk-1+細胞形成比例有減少趨勢.在BMP-4單因子實驗的基礎上,以25 ng/ml BMP-4聯閤10 ng/ml VEGF共同作用于ESC→EB誘導過程,Flk-1+細胞百分比明顯提高,在9天達到峰值,為(27.53±8.14)%,與自髮分化組[(8.77±2.35)%]及VEGF單因子組[(11.21±2.23)%]相比均有顯著性差異(p＜0.05).結論:BMP-4和VEGF聯閤使用可促進EB中胚層原始造血榦細胞的形成,為進一步模擬造血微環境定嚮誘導ESC造血分化提供瞭實驗依據.
본연구지재탐토골형태발생단백4(BMP-4)화혈관내피생장인자(VEGF)재유도배태간세포(ESC)형성의배체(EB)과정중촉진원시조혈간세포형성적작용.장소서E14 ESC재반고체배양기중유도위EB,근거배양체계중유무첨가인자분조:미첨가인자적자연분화조、함불동농도(5、15、25、50 ng/ml)적BMP-4조,재BMP-4단인자실험적기출상연합10 ng/ml VEGF조급단인자VEGF조.분별우3、6、9、12、15천시수획EB,용류식세포술검측Flk-1+세포함량.결과표명:수착첨가BMP-4인자농도적축점승고,EB중Flk-1+세포형성비례야축점증가,재제3천(D3)화제6천(D6)량개시점,25 ng/ml BMP-4작용조Flk-1+세포체도봉치,분별위(6.51±1.02)%화(7.70±1.12)%,여무BMP-4대조조급5 ng/ml조비교유통계학의의적차이(p＜0.05).연이재BMP-4농도승고지50ns/ml조건하Flk-1+세포형성비례유감소추세.재BMP-4단인자실험적기출상,이25 ng/ml BMP-4연합10 ng/ml VEGF공동작용우ESC→EB유도과정,Flk-1+세포백분비명현제고,재9천체도봉치,위(27.53±8.14)%,여자발분화조[(8.77±2.35)%]급VEGF단인자조[(11.21±2.23)%]상비균유현저성차이(p＜0.05).결론:BMP-4화VEGF연합사용가촉진EB중배층원시조혈간세포적형성,위진일보모의조혈미배경정향유도ESC조혈분화제공료실험의거.
