融合蛋白hJagged1ext-Fc毕赤酵母表达载体的构建及表达
융합단백hJagged1ext-Fc필적효모표체재체적구건급표체
Construction and Expression of A Fusion Protein Containing Extracellular Domain of Human Jaggedl and Fc Fragment of Human IgG1 in Pichia Pastoris
  • 万方数据
    中国实验血液学杂志 중국실험혈액학잡지
    JOURNAL OF EXPERIMENTAL HEMATOLOGY
    2008年 4期 910-914 ,共5页

    李国辉%康志杰%黄斯勇%何飞%徐恒%张丽%伍艳兰%牛晓丽%马长升%韩骅%梁英民

    리국휘%강지걸%황사용%하비%서항%장려%오염란%우효려%마장승%한화%량영민

    Jaggedl%hJagged1ext-Fc%造血干/祖细胞%Notch%融合蛋白%毕赤酵母 Jaggedl%hJagged1ext-Fc%造血榦/祖細胞%Notch%融閤蛋白%畢赤酵母
    Jaggedl%hJagged1ext-Fc%조혈간/조세포%Notch%융합단백%필적효모
    本研究旨在构建人IgG1 Fc蛋白及融合蛋白hJagged1ext-Fc,并在毕赤酵母GS115中表达.用RT-PCR法从人骨髓细胞中扩增hJagged1基因的胞外段.在测序正确后,将hJagged1基因的胞外段插入构建好的PIC-Fc载体,得到PIC-hJagged1ext-Fc.用MD平板筛选重组子,G418法筛选高拷贝转化子,经甲醇诱导表达后,采用SDSPAGE分析表达蛋白.结果表明:hJagged1基因的胞外段被有效地扩增.序列分析显示所构建的舍phJagged1ext-Fc融合基因的质粒与设计相同,人IgG1 Fc蛋白及融合蛋白hJagged1ext-Fc得到正确表达.结论:成功地构建了hJagged1ext-Fc融合基因的毕赤酵母表达载体,并在毕赤酵母中正确表达,为进一步研究Jagged1在造血干/祖细胞的体外扩增奠定了基础.
    본연구지재구건인IgG1 Fc단백급융합단백hJagged1ext-Fc,병재필적효모GS115중표체.용RT-PCR법종인골수세포중확증hJagged1기인적포외단.재측서정학후,장hJagged1기인적포외단삽입구건호적PIC-Fc재체,득도PIC-hJagged1ext-Fc.용MD평판사선중조자,G418법사선고고패전화자,경갑순유도표체후,채용SDSPAGE분석표체단백.결과표명:hJagged1기인적포외단피유효지확증.서렬분석현시소구건적사phJagged1ext-Fc융합기인적질립여설계상동,인IgG1 Fc단백급융합단백hJagged1ext-Fc득도정학표체.결론:성공지구건료hJagged1ext-Fc융합기인적필적효모표체재체,병재필적효모중정학표체,위진일보연구Jagged1재조혈간/조세포적체외확증전정료기출.
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