CAJ | 학술논문

背景:X染色体连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)相关因子1(XAF1)是新发现的肿瘤抑制因子,其在多种肿瘤细胞株中表达降低或缺失.目的:探讨XAF1在人胃癌细胞株和胃癌组织标本中表达缺失的机制及其潜在临床意义.方法:收集46例原发性胃癌手术切除石蜡包埋组织标本和30例非肿瘤患者内镜活检胃黏膜标本,提取基因组DNA.采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质印迹法检测人胃癌细胞株BGC-823和AGS中XAF1 mRNA和蛋白水平的表达.采用重亚硫酸盐修饰的基因组DNA序列PCR(BS-PCR)检测胃癌细胞株中XAF1启动子区域CpG位点的甲基化状态:采用甲基化特异性(MS)-PCR和非甲基化特异性(US)-PCR检测胃组织标本中相同区域的甲基化状态.结果:XAF1在BGC-823和AGS细胞中低表达,同时伴有异常DNA高甲基化;经5-氮-2-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)处理48h后,XAF1表达显著增强.胃组织标本中,XAF1甲基化阳性率在癌组织中为78.3%(36/46),癌旁组织中为65.2%(30/46),癌远端切缘正常组织中为28.3%(13/46),差异有统计学意义(P＜0.05);癌组织与癌远端切缘正常组织比较,XAF1甲基化阳性率差异有统计学意义(P＜0.01);非肿瘤胃黏膜XAFI甲基化阳性率仅为6.7%(2/30),较癌远端切缘正常组织明显降低,但差异无统计学意义(P＞0.5).结论:XAFI基因组DNA异常高甲基化是人胃癌组织中XAF1表达缺失的重要原因之一.XAF1高甲基化检测可作为一个潜在的胃癌早期诊断指标.
배경:X염색체련쇄조망억제단백(XIAP)상관인자1(XAF1)시신발현적종류억제인자,기재다충종류세포주중표체강저혹결실.목적:탐토XAF1재인위암세포주화위암조직표본중표체결실적궤제급기잠재림상의의.방법:수집46례원발성위암수술절제석사포매조직표본화30례비종류환자내경활검위점막표본,제취기인조DNA.채용역전록취합매련반응(RT-PCR)화단백질인적법검측인위암세포주BGC-823화AGS중XAF1 mRNA화단백수평적표체.채용중아류산염수식적기인조DNA서렬PCR(BS-PCR)검측위암세포주중XAF1계동자구역CpG위점적갑기화상태:채용갑기화특이성(MS)-PCR화비갑기화특이성(US)-PCR검측위조직표본중상동구역적갑기화상태.결과:XAF1재BGC-823화AGS세포중저표체,동시반유이상DNA고갑기화;경5-담-2-탈양포감(5-Aza-CdR)처리48h후,XAF1표체현저증강.위조직표본중,XAF1갑기화양성솔재암조직중위78.3%(36/46),암방조직중위65.2%(30/46),암원단절연정상조직중위28.3%(13/46),차이유통계학의의(P＜0.05);암조직여암원단절연정상조직비교,XAF1갑기화양성솔차이유통계학의의(P＜0.01);비종류위점막XAFI갑기화양성솔부위6.7%(2/30),교암원단절연정상조직명현강저,단차이무통계학의의(P＞0.5).결론:XAFI기인조DNA이상고갑기화시인위암조직중XAF1표체결실적중요원인지일.XAF1고갑기화검측가작위일개잠재적위암조기진단지표.