新疆医科大学学报
新疆醫科大學學報
신강의과대학학보
JOURNAL OF XINJIANG MEDICAL UNIVERSITY
2013年
6期
763-767
,共5页
LIU Yueming%刘悦明%祝军%郑司鹏%刘红
LIU Yueming%劉悅明%祝軍%鄭司鵬%劉紅
LIU Yueming%류열명%축군%정사붕%류홍
NK细胞%Mini&Midi%MACS%细胞因子
NK細胞%Mini&Midi%MACS%細胞因子
NK세포%Mini&Midi%MACS%세포인자
目的 探索用免疫磁珠分选高纯度CD3-CD56+CD16+CD19-CD45+NK细胞并研究体外保持NK细胞活性及体外扩增技术.方法 应用免疫磁珠阴性分选法(MACS)分离出高纯度的CD3-CD56+CD16+CD19-CD45+NK细胞,置于含10%胎牛血清的RPMI1640培养基中,分别加入500、1 000、6 000 U/mL 3种不同浓度的细胞因子IL-2,组成不同培养体系进行体外扩增.采用细胞计数法、流式细胞术免疫表型分析方法,比较3种细胞因子刺激组及对照组培养的NK细胞数量及纯度的变化.结果 免疫磁珠阴性分选后所得的高纯度CD3-CD56+CD16+CD19-CD45+NK细胞纯度由分选前的(29.66±2.31)%提高到(95.37±1.93)%,培养7 d后,空白对照组NK细胞纯度降低为(61.82±2.58)%,而加入细胞因子IL-2的3组NK细胞纯度均无明显差异(P>0.05).18 d后,空白对照组的NK细胞纯度降低至(4.28±1.56)%,而浓度为6 000 U/mL的实验组纯度为(93.72±2.29)%,与加入细胞因子IL-2前比较,差异无统计学意义(P>0.05).NK细胞中加入3种不同浓度细胞因子IL-2组500、1 000、6 000 U/mL未见明显扩增,差异无统计学意义(P>0.05).结论 经免疫磁珠分选法分选获得的NK细胞,在体外使用10%胎牛血清的RPMI1640培养基培养,添加刺激因子IL-2后,可有效提高NK细胞的存活率,为今后NK细胞的研究与免疫治疗提供了一种简单、有效保持NK细胞纯度的方法.
目的 探索用免疫磁珠分選高純度CD3-CD56+CD16+CD19-CD45+NK細胞併研究體外保持NK細胞活性及體外擴增技術.方法 應用免疫磁珠陰性分選法(MACS)分離齣高純度的CD3-CD56+CD16+CD19-CD45+NK細胞,置于含10%胎牛血清的RPMI1640培養基中,分彆加入500、1 000、6 000 U/mL 3種不同濃度的細胞因子IL-2,組成不同培養體繫進行體外擴增.採用細胞計數法、流式細胞術免疫錶型分析方法,比較3種細胞因子刺激組及對照組培養的NK細胞數量及純度的變化.結果 免疫磁珠陰性分選後所得的高純度CD3-CD56+CD16+CD19-CD45+NK細胞純度由分選前的(29.66±2.31)%提高到(95.37±1.93)%,培養7 d後,空白對照組NK細胞純度降低為(61.82±2.58)%,而加入細胞因子IL-2的3組NK細胞純度均無明顯差異(P>0.05).18 d後,空白對照組的NK細胞純度降低至(4.28±1.56)%,而濃度為6 000 U/mL的實驗組純度為(93.72±2.29)%,與加入細胞因子IL-2前比較,差異無統計學意義(P>0.05).NK細胞中加入3種不同濃度細胞因子IL-2組500、1 000、6 000 U/mL未見明顯擴增,差異無統計學意義(P>0.05).結論 經免疫磁珠分選法分選穫得的NK細胞,在體外使用10%胎牛血清的RPMI1640培養基培養,添加刺激因子IL-2後,可有效提高NK細胞的存活率,為今後NK細胞的研究與免疫治療提供瞭一種簡單、有效保持NK細胞純度的方法.
목적 탐색용면역자주분선고순도CD3-CD56+CD16+CD19-CD45+NK세포병연구체외보지NK세포활성급체외확증기술.방법 응용면역자주음성분선법(MACS)분리출고순도적CD3-CD56+CD16+CD19-CD45+NK세포,치우함10%태우혈청적RPMI1640배양기중,분별가입500、1 000、6 000 U/mL 3충불동농도적세포인자IL-2,조성불동배양체계진행체외확증.채용세포계수법、류식세포술면역표형분석방법,비교3충세포인자자격조급대조조배양적NK세포수량급순도적변화.결과 면역자주음성분선후소득적고순도CD3-CD56+CD16+CD19-CD45+NK세포순도유분선전적(29.66±2.31)%제고도(95.37±1.93)%,배양7 d후,공백대조조NK세포순도강저위(61.82±2.58)%,이가입세포인자IL-2적3조NK세포순도균무명현차이(P>0.05).18 d후,공백대조조적NK세포순도강저지(4.28±1.56)%,이농도위6 000 U/mL적실험조순도위(93.72±2.29)%,여가입세포인자IL-2전비교,차이무통계학의의(P>0.05).NK세포중가입3충불동농도세포인자IL-2조500、1 000、6 000 U/mL미견명현확증,차이무통계학의의(P>0.05).결론 경면역자주분선법분선획득적NK세포,재체외사용10%태우혈청적RPMI1640배양기배양,첨가자격인자IL-2후,가유효제고NK세포적존활솔,위금후NK세포적연구여면역치료제공료일충간단、유효보지NK세포순도적방법.
