中国真菌学杂志
中國真菌學雜誌
중국진균학잡지
CHINESE JOURNAL OF MYCOLOGY
2013年
2期
69-73
,共5页
谭宏月%李平%胡婵%朱红梅%顾军%温海
譚宏月%李平%鬍嬋%硃紅梅%顧軍%溫海
담굉월%리평%호선%주홍매%고군%온해
白念珠菌%MXR1基因%基因敲除
白唸珠菌%MXR1基因%基因敲除
백념주균%MXR1기인%기인고제
Candida albicans%MXR1 gene%gene disruption
目的 构建用于白念珠菌MXR1基因敲除的载体质粒,并通过Ura-Blaster策略敲除MXR1两条等位基因.方法 分别扩增白念珠菌MXR1基因ORF两侧上下游的片段,通过酶切与连接反应,将上下游片段分别插入到p5921质粒的hisG-URA 3-hisG盒两端,从而形成MXR1敲除载体质粒pUC-MXR1-URA3.通过Ura-Blaster策略将载体质粒转染到白念珠菌RM 1000内,并采用PCR和Southern-blot杂交方法鉴定各步转染、复筛所得的阳性克隆.结果 成功获得MXR1基因缺失的菌株.结论 MXR1基因缺失菌株的构建,有助于深入研究白念珠菌耐药机制.
目的 構建用于白唸珠菌MXR1基因敲除的載體質粒,併通過Ura-Blaster策略敲除MXR1兩條等位基因.方法 分彆擴增白唸珠菌MXR1基因ORF兩側上下遊的片段,通過酶切與連接反應,將上下遊片段分彆插入到p5921質粒的hisG-URA 3-hisG盒兩耑,從而形成MXR1敲除載體質粒pUC-MXR1-URA3.通過Ura-Blaster策略將載體質粒轉染到白唸珠菌RM 1000內,併採用PCR和Southern-blot雜交方法鑒定各步轉染、複篩所得的暘性剋隆.結果 成功穫得MXR1基因缺失的菌株.結論 MXR1基因缺失菌株的構建,有助于深入研究白唸珠菌耐藥機製.
목적 구건용우백념주균MXR1기인고제적재체질립,병통과Ura-Blaster책략고제MXR1량조등위기인.방법 분별확증백념주균MXR1기인ORF량측상하유적편단,통과매절여련접반응,장상하유편단분별삽입도p5921질립적hisG-URA 3-hisG합량단,종이형성MXR1고제재체질립pUC-MXR1-URA3.통과Ura-Blaster책략장재체질립전염도백념주균RM 1000내,병채용PCR화Southern-blot잡교방법감정각보전염、복사소득적양성극륭.결과 성공획득MXR1기인결실적균주.결론 MXR1기인결실균주적구건,유조우심입연구백념주균내약궤제.
