中国中西医结合杂志
中國中西醫結閤雜誌
중국중서의결합잡지
CHINESE JOURNAL OF INTEGRATED TRADITIONAL AND WESTERN MEDICINE
2014年
1期
81-86
,共6页
白细胞介素-1 β%退变%膝关节软骨细胞%体外培养%骨关节炎
白細胞介素-1 β%退變%膝關節軟骨細胞%體外培養%骨關節炎
백세포개소-1 β%퇴변%슬관절연골세포%체외배양%골관절염
IL-1β%degeneration%cartilage cell of knee joints%in vitro culture%osteoarthritis
目的 探讨并鉴定IL-1β 诱导新西兰大白兔膝关节软骨细胞退变的方法,为从体外培养退变软骨细胞的中医药研究骨关节炎提供实验依据.方法 无菌条件下取4周龄新西兰大白兔双侧膝关节软骨,采用Ⅱ型胶原酶消化并机械吹打的方法分离关节软骨细胞,细胞传至第2代时,随机分为正常对照组(Z组)与IL-1β 诱导的模型组(M组),Z组不加任何干预,M组加入含10 ng/mL IL-1β 的10％ FBS培养基,两组均传至第3代.采用形态学、甲苯胺蓝染色、Ⅱ型胶原免疫组织化学染色及流式细胞仪技术比较鉴定.结果 倒置显微镜下见Z组第2、3代关节软骨细胞表型稳定,增殖力良好,绝大部分细胞变为梭形、铺路石样,M组第2、3代关节软骨细胞变为长梭形或不规则形状;甲苯胺蓝染色及免疫组织化学技术显示Z组第2、3代关节软骨细胞染色后阳性表达均优于M组;流式细胞仪分析显示,M组第2代软骨细胞凋亡率与Z组比较,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 采用IL-1β 诱导新西兰大白兔膝关节软骨细胞体外培养模型,细胞明显退变,可用于骨关节炎的相关实验研究.
目的 探討併鑒定IL-1β 誘導新西蘭大白兔膝關節軟骨細胞退變的方法,為從體外培養退變軟骨細胞的中醫藥研究骨關節炎提供實驗依據.方法 無菌條件下取4週齡新西蘭大白兔雙側膝關節軟骨,採用Ⅱ型膠原酶消化併機械吹打的方法分離關節軟骨細胞,細胞傳至第2代時,隨機分為正常對照組(Z組)與IL-1β 誘導的模型組(M組),Z組不加任何榦預,M組加入含10 ng/mL IL-1β 的10％ FBS培養基,兩組均傳至第3代.採用形態學、甲苯胺藍染色、Ⅱ型膠原免疫組織化學染色及流式細胞儀技術比較鑒定.結果 倒置顯微鏡下見Z組第2、3代關節軟骨細胞錶型穩定,增殖力良好,絕大部分細胞變為梭形、鋪路石樣,M組第2、3代關節軟骨細胞變為長梭形或不規則形狀;甲苯胺藍染色及免疫組織化學技術顯示Z組第2、3代關節軟骨細胞染色後暘性錶達均優于M組;流式細胞儀分析顯示,M組第2代軟骨細胞凋亡率與Z組比較,差異有統計學意義(P＜0.01).結論 採用IL-1β 誘導新西蘭大白兔膝關節軟骨細胞體外培養模型,細胞明顯退變,可用于骨關節炎的相關實驗研究.
목적 탐토병감정IL-1β 유도신서란대백토슬관절연골세포퇴변적방법,위종체외배양퇴변연골세포적중의약연구골관절염제공실험의거.방법 무균조건하취4주령신서란대백토쌍측슬관절연골,채용Ⅱ형효원매소화병궤계취타적방법분리관절연골세포,세포전지제2대시,수궤분위정상대조조(Z조)여IL-1β 유도적모형조(M조),Z조불가임하간예,M조가입함10 ng/mL IL-1β 적10％ FBS배양기,량조균전지제3대.채용형태학、갑분알람염색、Ⅱ형효원면역조직화학염색급류식세포의기술비교감정.결과 도치현미경하견Z조제2、3대관절연골세포표형은정,증식력량호,절대부분세포변위사형、포로석양,M조제2、3대관절연골세포변위장사형혹불규칙형상;갑분알람염색급면역조직화학기술현시Z조제2、3대관절연골세포염색후양성표체균우우M조;류식세포의분석현시,M조제2대연골세포조망솔여Z조비교,차이유통계학의의(P＜0.01).결론 채용IL-1β 유도신서란대백토슬관절연골세포체외배양모형,세포명현퇴변,가용우골관절염적상관실험연구.
