农业生物技术学报
農業生物技術學報
농업생물기술학보
JOURNAL OF AGRICULTURAL BIOTECHNOLOGY
2010年
1期
198-204
,共7页
隋进强%云彦%刘文强%殷吉庆%胡勇策%雷安民
隋進彊%雲彥%劉文彊%慇吉慶%鬍勇策%雷安民
수진강%운언%류문강%은길경%호용책%뢰안민
牛%卵母细胞%显微注射%mRNA%质粒
牛%卵母細胞%顯微註射%mRNA%質粒
우%란모세포%현미주사%mRNA%질립
Bovine%Oocytes%Microinjection%mRNA%Plasmid
本研究通过牛(Bos taurus)卵母细胞体外成熟培养不同时间(0和10 h),剥除卵母细胞外周的颗粒细胞后继续培养,观察其与不脱颗粒细胞正常体外成熟培养卵母细胞之间的差异.研究结果显示:成熟培养0脱颗粒细胞的卵母细胞,与正常成熟培养的卵母细胞在成熟率(19.51%vs.80.14%,P<0.05)、卵裂率(27.08%vs.82.61%,P<0.05)和孤雌激活胚胎囊胚率(7.69%vs.21.71%,P<0.05)差异显著;成熟培养10 h后脱颗粒细胞的牛卵母细胞,与正常体外成熟培养的卵母细胞相比,在成熟率(82.71%vs.80.14%,P>0.05)、卵裂率(83.01%vs.82.61%,P>0.05)和孤雌激活胚胎囊胚率(19.30%vs.21.71%,P>0.05)无显著差异.向成熟培养10h脱颗粒细胞的卵母细胞内注射pVenus-Hlfoo mRNA,pVenus,pDsRed1-N1和重组质粒pDsRedl-Hle都能够得到表达.非功能标记基因显微注射组与对照组在卵母细胞成熟率(81.42%vs.82.03%,P>0.05)、卵裂率(75.24%vs.78.15%,P>0.05)和孤雌激活胚胎囊胚率(17.42%vs.18.82%,P>0.05)上差异不显著.研究结果提示:在成熟培养10 h,剥离颗粒细胞不会影响牛卵母细胞的发育潜能,这一技术平台可以用于牛卵母细胞体外成熟分子机制的研究.
本研究通過牛(Bos taurus)卵母細胞體外成熟培養不同時間(0和10 h),剝除卵母細胞外週的顆粒細胞後繼續培養,觀察其與不脫顆粒細胞正常體外成熟培養卵母細胞之間的差異.研究結果顯示:成熟培養0脫顆粒細胞的卵母細胞,與正常成熟培養的卵母細胞在成熟率(19.51%vs.80.14%,P<0.05)、卵裂率(27.08%vs.82.61%,P<0.05)和孤雌激活胚胎囊胚率(7.69%vs.21.71%,P<0.05)差異顯著;成熟培養10 h後脫顆粒細胞的牛卵母細胞,與正常體外成熟培養的卵母細胞相比,在成熟率(82.71%vs.80.14%,P>0.05)、卵裂率(83.01%vs.82.61%,P>0.05)和孤雌激活胚胎囊胚率(19.30%vs.21.71%,P>0.05)無顯著差異.嚮成熟培養10h脫顆粒細胞的卵母細胞內註射pVenus-Hlfoo mRNA,pVenus,pDsRed1-N1和重組質粒pDsRedl-Hle都能夠得到錶達.非功能標記基因顯微註射組與對照組在卵母細胞成熟率(81.42%vs.82.03%,P>0.05)、卵裂率(75.24%vs.78.15%,P>0.05)和孤雌激活胚胎囊胚率(17.42%vs.18.82%,P>0.05)上差異不顯著.研究結果提示:在成熟培養10 h,剝離顆粒細胞不會影響牛卵母細胞的髮育潛能,這一技術平檯可以用于牛卵母細胞體外成熟分子機製的研究.
본연구통과우(Bos taurus)란모세포체외성숙배양불동시간(0화10 h),박제란모세포외주적과립세포후계속배양,관찰기여불탈과립세포정상체외성숙배양란모세포지간적차이.연구결과현시:성숙배양0탈과립세포적란모세포,여정상성숙배양적란모세포재성숙솔(19.51%vs.80.14%,P<0.05)、란렬솔(27.08%vs.82.61%,P<0.05)화고자격활배태낭배솔(7.69%vs.21.71%,P<0.05)차이현저;성숙배양10 h후탈과립세포적우란모세포,여정상체외성숙배양적란모세포상비,재성숙솔(82.71%vs.80.14%,P>0.05)、란렬솔(83.01%vs.82.61%,P>0.05)화고자격활배태낭배솔(19.30%vs.21.71%,P>0.05)무현저차이.향성숙배양10h탈과립세포적란모세포내주사pVenus-Hlfoo mRNA,pVenus,pDsRed1-N1화중조질립pDsRedl-Hle도능구득도표체.비공능표기기인현미주사조여대조조재란모세포성숙솔(81.42%vs.82.03%,P>0.05)、란렬솔(75.24%vs.78.15%,P>0.05)화고자격활배태낭배솔(17.42%vs.18.82%,P>0.05)상차이불현저.연구결과제시:재성숙배양10 h,박리과립세포불회영향우란모세포적발육잠능,저일기술평태가이용우우란모세포체외성숙분자궤제적연구.