农业生物技术学报
農業生物技術學報
농업생물기술학보
JOURNAL OF AGRICULTURAL BIOTECHNOLOGY
2010年
1期
135-140
,共6页
信彩云%徐立%符运柳%丛汉卿%李志英
信綵雲%徐立%符運柳%叢漢卿%李誌英
신채운%서립%부운류%총한경%리지영
阿蒂擎天%开花%乙烯%抑制差减杂交
阿蒂擎天%開花%乙烯%抑製差減雜交
아체경천%개화%을희%억제차감잡교
Guzmania Attila%Flowering%Ethylene%Suppression subtractive hybridization
本研究以阿蒂擎天(Cuzmania Attila)植株为材料,利用400μL/L 乙烯利灌心,处理0、1 h、6 h和24 h,分别提取总RNA,纯化获得mRNA,以处理0 h的材料为驱动,运用抑制差减杂交技术进行正向差减杂交,获得3个差异表达基因文库.随机挑取3个文库中的1063个白斑,利用菌落PCR方法,筛选到990个阳性克隆,全部进行了序列测定与分析,结果表明,其中有518个基因序列,205个片段与GenBank中已知基因高度同源,313个片段未发现同源基因.利用地高辛标记对部分序列进行反向Northern斑点杂交分析,发现乙烯处理1~6h,诱导表达的基因数量最多
本研究以阿蒂擎天(Cuzmania Attila)植株為材料,利用400μL/L 乙烯利灌心,處理0、1 h、6 h和24 h,分彆提取總RNA,純化穫得mRNA,以處理0 h的材料為驅動,運用抑製差減雜交技術進行正嚮差減雜交,穫得3箇差異錶達基因文庫.隨機挑取3箇文庫中的1063箇白斑,利用菌落PCR方法,篩選到990箇暘性剋隆,全部進行瞭序列測定與分析,結果錶明,其中有518箇基因序列,205箇片段與GenBank中已知基因高度同源,313箇片段未髮現同源基因.利用地高辛標記對部分序列進行反嚮Northern斑點雜交分析,髮現乙烯處理1~6h,誘導錶達的基因數量最多
본연구이아체경천(Cuzmania Attila)식주위재료,이용400μL/L 을희리관심,처리0、1 h、6 h화24 h,분별제취총RNA,순화획득mRNA,이처리0 h적재료위구동,운용억제차감잡교기술진행정향차감잡교,획득3개차이표체기인문고.수궤도취3개문고중적1063개백반,이용균락PCR방법,사선도990개양성극륭,전부진행료서렬측정여분석,결과표명,기중유518개기인서렬,205개편단여GenBank중이지기인고도동원,313개편단미발현동원기인.이용지고신표기대부분서렬진행반향Northern반점잡교분석,발현을희처리1~6h,유도표체적기인수량최다