中南药学
中南藥學
중남약학
CENTRAL SOUTH PHARMACY
2010年
1期
11-15
,共5页
胡海梅%黄宏靓%谭倩雯%杨清波%邱培元
鬍海梅%黃宏靚%譚倩雯%楊清波%邱培元
호해매%황굉정%담천문%양청파%구배원
非病毒基因载体%鱼精蛋白/DNA复合物%生物性能
非病毒基因載體%魚精蛋白/DNA複閤物%生物性能
비병독기인재체%어정단백/DNA복합물%생물성능
目的 研究非病毒基因载体鱼精蛋白/DNA复合物的制备方法及对其细胞毒性、不同量鱼精蛋白对pDNA的结合能力、体外细胞转染率.方法 不同量鱼精蛋白与DNA在室温孵育后,得到鱼精蛋白/DNA复合物;用MTT法检测鱼精蛋白对HeLa子宫颈癌细胞的毒性作用,同时与PEI进行比较;利用琼脂糖电泳实验测定不同N/P比形成复合物时对DNA的阻滞情况;用结合沉淀试验比较不同量鱼精蛋白对包裹DNA的能力的影响;在荧光显微镜下观察比较它们对BEL-7402肝癌细胞转染率的大小.结果 当鱼精蛋白/DNA复合物浓度升高时,对HeLa子宫颈癌细胞的毒性均为0级,而聚乙烯亚胺(PEI)浓度升高时,对细胞的毒性明显增加;鱼精蛋白与质粒DNA形成复合物时所需的N/P比为1.5:1,较PEI/DNA复合物形成时所需的N/P比2:1要小;鱼精蛋白包裹DNA的能力随N/P比增大而增强,并且包裹DNA的能力要比PEI/DNA复合物转变得快;鱼精蛋白/DNA复合物对BEL-7402肝癌细胞的转染率较PEI/DNA复合物低,但毒性较低.结论 鱼精蛋白/DNA复合物是一种制备工艺简单、细胞毒性小、对pDNA包裹能力高、转染率相对较高,具有一定应用潜力的非病毒基因载体.
目的 研究非病毒基因載體魚精蛋白/DNA複閤物的製備方法及對其細胞毒性、不同量魚精蛋白對pDNA的結閤能力、體外細胞轉染率.方法 不同量魚精蛋白與DNA在室溫孵育後,得到魚精蛋白/DNA複閤物;用MTT法檢測魚精蛋白對HeLa子宮頸癌細胞的毒性作用,同時與PEI進行比較;利用瓊脂糖電泳實驗測定不同N/P比形成複閤物時對DNA的阻滯情況;用結閤沉澱試驗比較不同量魚精蛋白對包裹DNA的能力的影響;在熒光顯微鏡下觀察比較它們對BEL-7402肝癌細胞轉染率的大小.結果 噹魚精蛋白/DNA複閤物濃度升高時,對HeLa子宮頸癌細胞的毒性均為0級,而聚乙烯亞胺(PEI)濃度升高時,對細胞的毒性明顯增加;魚精蛋白與質粒DNA形成複閤物時所需的N/P比為1.5:1,較PEI/DNA複閤物形成時所需的N/P比2:1要小;魚精蛋白包裹DNA的能力隨N/P比增大而增彊,併且包裹DNA的能力要比PEI/DNA複閤物轉變得快;魚精蛋白/DNA複閤物對BEL-7402肝癌細胞的轉染率較PEI/DNA複閤物低,但毒性較低.結論 魚精蛋白/DNA複閤物是一種製備工藝簡單、細胞毒性小、對pDNA包裹能力高、轉染率相對較高,具有一定應用潛力的非病毒基因載體.
목적 연구비병독기인재체어정단백/DNA복합물적제비방법급대기세포독성、불동량어정단백대pDNA적결합능력、체외세포전염솔.방법 불동량어정단백여DNA재실온부육후,득도어정단백/DNA복합물;용MTT법검측어정단백대HeLa자궁경암세포적독성작용,동시여PEI진행비교;이용경지당전영실험측정불동N/P비형성복합물시대DNA적조체정황;용결합침정시험비교불동량어정단백대포과DNA적능력적영향;재형광현미경하관찰비교타문대BEL-7402간암세포전염솔적대소.결과 당어정단백/DNA복합물농도승고시,대HeLa자궁경암세포적독성균위0급,이취을희아알(PEI)농도승고시,대세포적독성명현증가;어정단백여질립DNA형성복합물시소수적N/P비위1.5:1,교PEI/DNA복합물형성시소수적N/P비2:1요소;어정단백포과DNA적능력수N/P비증대이증강,병차포과DNA적능력요비PEI/DNA복합물전변득쾌;어정단백/DNA복합물대BEL-7402간암세포적전염솔교PEI/DNA복합물저,단독성교저.결론 어정단백/DNA복합물시일충제비공예간단、세포독성소、대pDNA포과능력고、전염솔상대교고,구유일정응용잠력적비병독기인재체.
