CAJ | 학술논문

目的提高小鼠体细胞核移植过程中融合效率.方法使用CRY-3型和CE-450型细胞融合仪对B6D2F1小鼠去核卵母细胞与该品系小鼠胎儿成纤维细胞构成的重构胚进行融合,通过PEG/DMSO对供核细胞的预处理,比较了不同融合液,不同电极形状融合槽和供核细胞代次对融合率的影响.结果 (1)以PEG/DMSO对供核细胞预处理5 min的融合率显著高于同条件下未处理组(51.11%vs 25.64%)(P<0.05);(2)融合液中含0.1 g/L聚乙烯醇(PVA)组的融合率高于无PVA组;重构胚在甘露醇浓度为0.32 mol/L融合液中的融合率(48.21%)高于其他甘露醇浓度组(27.78%,41.67%和30.11%);(3)使用针状电极融合槽时的融合率(42.31%,43.13%)高于同条件下平行丝状电极融合槽组(30.43%,33.33%),其中又以在2 000 V/cm,20μs,2个脉冲时,交流电预处理30 s组最高(43.13%);(4)供核细胞传代一次后融合率随着传代次数的增加而下降.结论通过PEG/DMSO对供核细胞进行预处理,并在融合液中添加PVA时,结合优化的融合条件可以提高小鼠体细胞核移植过程中融合率.
목적 제고소서체세포핵이식과정중융합효솔.방법 사용CRY-3형화CE-450형세포융합의대B6D2F1소서거핵란모세포여해품계소서태인성섬유세포구성적중구배진행융합,통과PEG/DMSO대공핵세포적예처리,비교료불동융합액,불동전겁형상융합조화공핵세포대차대융합솔적영향.결과 (1)이PEG/DMSO대공핵세포예처리5 min적융합솔현저고우동조건하미처리조(51.11%vs 25.64%)(P<0.05);(2)융합액중함0.1 g/L취을희순(PVA)조적융합솔고우무PVA조;중구배재감로순농도위0.32 mol/L융합액중적융합솔(48.21%)고우기타감로순농도조(27.78%,41.67%화30.11%);(3)사용침상전겁융합조시적융합솔(42.31%,43.13%)고우동조건하평행사상전겁융합조조(30.43%,33.33%),기중우이재2 000 V/cm,20μs,2개맥충시,교류전예처리30 s조최고(43.13%);(4)공핵세포전대일차후융합솔수착전대차수적증가이하강.결론 통과PEG/DMSO대공핵세포진행예처리,병재융합액중첨가PVA시,결합우화적융합조건가이제고소서체세포핵이식과정중융합솔.