截短型HCV NS5B RNA聚合酶在大肠杆菌中表达纯化及鉴定
절단형HCV NS5B RNA취합매재대장간균중표체순화급감정
Expression, Purification and Indentification of the Truncated HCV NS5B RNA Polymerase in the E. coli
  • 万方数据
    科学技术与工程 과학기술여공정
    SCIENCE TECHNOLOGY AND ENGINEERING
    2010年 4期 863-867 ,共5页

    田江红%雷迎峰%尹文%陈任安%汪桦%吕欣%杨敬%孙梦宁%姚敏%徐志凯

    전강홍%뢰영봉%윤문%진임안%왕화%려흔%양경%손몽저%요민%서지개

    HCV%NS5B RNA聚合酶%大肠杆菌%蛋白表达 HCV%NS5B RNA聚閤酶%大腸桿菌%蛋白錶達
    HCV%NS5B RNA취합매%대장간균%단백표체
    为构建HCV截短型ns5b△21基因的原核表达质粒;在大肠杆菌中表达NS5B蛋白并纯化,制备其抗体.运用软件设计引物,以BB7复制子为模板PCR扩增ns5b△21基因;克隆入原核表达载体pRSETA.将重组表达质粒pRSETA-ns5b△21转化B121大肠杆菌,并诱导表达、可溶性分析及纯化;用纯化的NS5B蛋白免疫小鼠制备多克隆抗体.结果酶切鉴定和序列测定表明成功的构建了重组表达质粒pRSETA-ns5b△21;其经IPTG诱导后行SDS-PAGE可见新生表达条带,Western-blot证实了其特异性和抗原性良好;利用镍离子亲和层析和电洗脱方法获得了纯化NS5B蛋白;用纯化蛋白免疫小鼠制备出了多价抗血清.说明表达和纯化的截短型HCV NS5B RNA聚合酶可用于下一步筛选单链抗体.
    위구건HCV절단형ns5b△21기인적원핵표체질립;재대장간균중표체NS5B단백병순화,제비기항체.운용연건설계인물,이BB7복제자위모판PCR확증ns5b△21기인;극륭입원핵표체재체pRSETA.장중조표체질립pRSETA-ns5b△21전화B121대장간균,병유도표체、가용성분석급순화;용순화적NS5B단백면역소서제비다극륭항체.결과매절감정화서렬측정표명성공적구건료중조표체질립pRSETA-ns5b△21;기경IPTG유도후행SDS-PAGE가견신생표체조대,Western-blot증실료기특이성화항원성량호;이용얼리자친화층석화전세탈방법획득료순화NS5B단백;용순화단백면역소서제비출료다개항혈청.설명표체화순화적절단형HCV NS5B RNA취합매가용우하일보사선단련항체.
    원문보기 원문다운로드 사이트로이동
저자의 최근 논문