中国美容医学
中國美容醫學
중국미용의학
CHINESE JOURNAL OF AESTHETIC MEDICINE
2012年
15期
1981-1984
,共4页
王儆%陈亮%陶熹%陈卓%王珍祥%李世荣
王儆%陳亮%陶熹%陳卓%王珍祥%李世榮
왕경%진량%도희%진탁%왕진상%리세영
SFRP2%腺病毒%增生性瘢痕%成纤维细胞
SFRP2%腺病毒%增生性瘢痕%成纖維細胞
SFRP2%선병독%증생성반흔%성섬유세포
目的:成功构建携带SFRP2基因的腺病毒载体.方法:从pGBKT-SFRP2质粒中扩增SFRP2基因,将SFRP2基因亚克隆至质粒穿梭载体pAd-Track-CMV.用脂质体转染法将重组腺病毒pAd-Track-PPAR γ 2-CMV和pAdEasy-1共转染293细胞,成功构建的重组腺病毒Ad-SFRP2,确定转染效率.原代培养增生性瘢痕成纤维细胞,利用Ad-SFRP2感染该细胞.通过RT-PCR和Western Blot分别检测感染后人瘢痕成纤维细胞及对照组细胞中SFRP2基因mRNA和蛋白表达水平.结果:RT-PCR检测结果显示腺病毒Ad-SFRP2的PCR产物约为904bp,SFRP2 mRNA表达水平明显增高；用抗SFRP2多克隆抗体进行Western blot检测为阳性,感染的重组腺病毒载体在人瘢痕成纤维细胞中SFRP2蛋白有较高的稳定表达.结论:成功构建含有人SFRP2基因的重组腺病毒Ad-SFRP2;它可有效提高人增生性瘢痕成纤维细胞中SFRP2基因的表达水平.
目的:成功構建攜帶SFRP2基因的腺病毒載體.方法:從pGBKT-SFRP2質粒中擴增SFRP2基因,將SFRP2基因亞剋隆至質粒穿梭載體pAd-Track-CMV.用脂質體轉染法將重組腺病毒pAd-Track-PPAR γ 2-CMV和pAdEasy-1共轉染293細胞,成功構建的重組腺病毒Ad-SFRP2,確定轉染效率.原代培養增生性瘢痕成纖維細胞,利用Ad-SFRP2感染該細胞.通過RT-PCR和Western Blot分彆檢測感染後人瘢痕成纖維細胞及對照組細胞中SFRP2基因mRNA和蛋白錶達水平.結果:RT-PCR檢測結果顯示腺病毒Ad-SFRP2的PCR產物約為904bp,SFRP2 mRNA錶達水平明顯增高；用抗SFRP2多剋隆抗體進行Western blot檢測為暘性,感染的重組腺病毒載體在人瘢痕成纖維細胞中SFRP2蛋白有較高的穩定錶達.結論:成功構建含有人SFRP2基因的重組腺病毒Ad-SFRP2;它可有效提高人增生性瘢痕成纖維細胞中SFRP2基因的錶達水平.
목적:성공구건휴대SFRP2기인적선병독재체.방법:종pGBKT-SFRP2질립중확증SFRP2기인,장SFRP2기인아극륭지질립천사재체pAd-Track-CMV.용지질체전염법장중조선병독pAd-Track-PPAR γ 2-CMV화pAdEasy-1공전염293세포,성공구건적중조선병독Ad-SFRP2,학정전염효솔.원대배양증생성반흔성섬유세포,이용Ad-SFRP2감염해세포.통과RT-PCR화Western Blot분별검측감염후인반흔성섬유세포급대조조세포중SFRP2기인mRNA화단백표체수평.결과:RT-PCR검측결과현시선병독Ad-SFRP2적PCR산물약위904bp,SFRP2 mRNA표체수평명현증고；용항SFRP2다극륭항체진행Western blot검측위양성,감염적중조선병독재체재인반흔성섬유세포중SFRP2단백유교고적은정표체.결론:성공구건함유인SFRP2기인적중조선병독Ad-SFRP2;타가유효제고인증생성반흔성섬유세포중SFRP2기인적표체수평.
