中国奶牛
中國奶牛
중국내우
CHINA DAIRY CATTLE
2010年
2期
9-11
,共3页
曹雪%张顺亮%姜鹭%葛克山%丛艳君%任发政
曹雪%張順亮%薑鷺%葛剋山%叢豔君%任髮政
조설%장순량%강로%갈극산%총염군%임발정
Cdc2相关蛋白激酶%单克隆抗体%制备
Cdc2相關蛋白激酶%單剋隆抗體%製備
Cdc2상관단백격매%단극륭항체%제비
本试验以Cdc2相关蛋白激酶PFTK1的120～141位多肽段与载体蛋白KLH偶联制备人工抗原,免疫Balb/c小鼠,取高免疫效价的小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0在PEG4000作用下进行融合,通过有限稀释法最终得到了2株分泌抗PFTK1抗体的杂交瘤细胞,分别命名为4E7和2E3,经鉴定2株抗体均为IgM亚型,轻链均为K型.经过Westem blotting鉴定该抗体能够与PFTK1(1～139肽段)特异性结合.此抗体经过优球蛋白沉淀法纯化后,其纯度达到86.8%.该抗体的制备为研究蛋白激酶PFTK1功能奠定了基础.
本試驗以Cdc2相關蛋白激酶PFTK1的120～141位多肽段與載體蛋白KLH偶聯製備人工抗原,免疫Balb/c小鼠,取高免疫效價的小鼠脾細胞與骨髓瘤細胞SP2/0在PEG4000作用下進行融閤,通過有限稀釋法最終得到瞭2株分泌抗PFTK1抗體的雜交瘤細胞,分彆命名為4E7和2E3,經鑒定2株抗體均為IgM亞型,輕鏈均為K型.經過Westem blotting鑒定該抗體能夠與PFTK1(1～139肽段)特異性結閤.此抗體經過優毬蛋白沉澱法純化後,其純度達到86.8%.該抗體的製備為研究蛋白激酶PFTK1功能奠定瞭基礎.
본시험이Cdc2상관단백격매PFTK1적120～141위다태단여재체단백KLH우련제비인공항원,면역Balb/c소서,취고면역효개적소서비세포여골수류세포SP2/0재PEG4000작용하진행융합,통과유한희석법최종득도료2주분비항PFTK1항체적잡교류세포,분별명명위4E7화2E3,경감정2주항체균위IgM아형,경련균위K형.경과Westem blotting감정해항체능구여PFTK1(1～139태단)특이성결합.차항체경과우구단백침정법순화후,기순도체도86.8%.해항체적제비위연구단백격매PFTK1공능전정료기출.
