基因组学与应用生物学
基因組學與應用生物學
기인조학여응용생물학
GENOMICS AND APPLIED BIOLOGY
2009年
6期
1197-1203
,共7页
高剑%肖苏生%王文华%曾涛%曾会才
高劍%肖囌生%王文華%曾濤%曾會纔
고검%초소생%왕문화%증도%증회재
香蕉枯萎病%4号生理小种%T-DNA插入%优化体系
香蕉枯萎病%4號生理小種%T-DNA插入%優化體繫
향초고위병%4호생리소충%T-DNA삽입%우화체계
Banana wilt disease%Fusarium oxysporum f.sp.cubense(FOC)race4%T-DNA insertion%Optimized the transformation
香蕉枯萎病是世界范围内香蕉种植区最为严重的病害之一,严重威胁和影响着香蕉产业的发展.本文针对香蕉枯萎病病原菌的4号生理小种,建立了农杆菌介导的转化体系,确定了影响转化效率主要因子的优化体系是:农杆菌在IM培养基诱导前农杆菌OD_(600)为0.15、农杆菌经IM液体培养基诱导的时间为7 h、乙酰丁香酮(AS)浓度为150 μmol/L、Focr4孢子浓度为1×10~6个/mL、共培养时间为48 h、培养温度为25℃、诱导培养基pH值为5.5.在此条件下,转化效率能达到700～800个转化子/10~6个香蕉枯萎病菌孢子.PCR验证表明外源的T-DNA已经成功随机地整合到该病原菌基因组中.目前,应用该转化体系已获得2 300多个转化子,为后续克隆相关致病基因打下了良好基础.
香蕉枯萎病是世界範圍內香蕉種植區最為嚴重的病害之一,嚴重威脅和影響著香蕉產業的髮展.本文針對香蕉枯萎病病原菌的4號生理小種,建立瞭農桿菌介導的轉化體繫,確定瞭影響轉化效率主要因子的優化體繫是:農桿菌在IM培養基誘導前農桿菌OD_(600)為0.15、農桿菌經IM液體培養基誘導的時間為7 h、乙酰丁香酮(AS)濃度為150 μmol/L、Focr4孢子濃度為1×10~6箇/mL、共培養時間為48 h、培養溫度為25℃、誘導培養基pH值為5.5.在此條件下,轉化效率能達到700～800箇轉化子/10~6箇香蕉枯萎病菌孢子.PCR驗證錶明外源的T-DNA已經成功隨機地整閤到該病原菌基因組中.目前,應用該轉化體繫已穫得2 300多箇轉化子,為後續剋隆相關緻病基因打下瞭良好基礎.
향초고위병시세계범위내향초충식구최위엄중적병해지일,엄중위협화영향착향초산업적발전.본문침대향초고위병병원균적4호생리소충,건립료농간균개도적전화체계,학정료영향전화효솔주요인자적우화체계시:농간균재IM배양기유도전농간균OD_(600)위0.15、농간균경IM액체배양기유도적시간위7 h、을선정향동(AS)농도위150 μmol/L、Focr4포자농도위1×10~6개/mL、공배양시간위48 h、배양온도위25℃、유도배양기pH치위5.5.재차조건하,전화효솔능체도700～800개전화자/10~6개향초고위병균포자.PCR험증표명외원적T-DNA이경성공수궤지정합도해병원균기인조중.목전,응용해전화체계이획득2 300다개전화자,위후속극륭상관치병기인타하료량호기출.
