高技术通讯
高技術通訊
고기술통신
HIGH TECHNOLOGY LETTERS
2010年
2期
208-213
,共6页
许建明%张念之%蒋一男%张利峰%夏春
許建明%張唸之%蔣一男%張利峰%夏春
허건명%장념지%장일남%장리봉%하춘
病毒性出血性败血症病毒(VHSV)%Taqman MGB探针%荧光RT-PCR法%定量检测
病毒性齣血性敗血癥病毒(VHSV)%Taqman MGB探針%熒光RT-PCR法%定量檢測
병독성출혈성패혈증병독(VHSV)%Taqman MGB탐침%형광RT-PCR법%정량검측
viral hemorrhagic septicemia virus (VHSV)%Taqman MGB probe%real-time RT-PCR%quantitative detection
为建立准确实时地定量检测病毒性出血性败血症病毒(VHSV),在VHSV-N基因保守区设计了Taqman MGB探针与引物对,随后,采用体外转录技术获得了VHSV-N基因RNA,并以此为绝对定量标准品,建立了绝对定量(AQ)检测VHSV的实时荧光RT-PCR法(AQ-RT-PCR方法),并与世界动物卫生组织(OIE)推荐的普通RT-PCR法进行了比较.此荧光RT-PCR法特异性好,与其他鱼类弹状病毒无交叉反应.检测线性范围为10~(10)～10~2拷贝/反应,灵法度达10~2 拷贝/反应.此检测灵敏度比OIE推举的RT-PCR法高出5个数量级,比嵌套RT-PCR高出1个数量级.此法是出入境检疫VHSV的有效方法.
為建立準確實時地定量檢測病毒性齣血性敗血癥病毒(VHSV),在VHSV-N基因保守區設計瞭Taqman MGB探針與引物對,隨後,採用體外轉錄技術穫得瞭VHSV-N基因RNA,併以此為絕對定量標準品,建立瞭絕對定量(AQ)檢測VHSV的實時熒光RT-PCR法(AQ-RT-PCR方法),併與世界動物衛生組織(OIE)推薦的普通RT-PCR法進行瞭比較.此熒光RT-PCR法特異性好,與其他魚類彈狀病毒無交扠反應.檢測線性範圍為10~(10)～10~2拷貝/反應,靈法度達10~2 拷貝/反應.此檢測靈敏度比OIE推舉的RT-PCR法高齣5箇數量級,比嵌套RT-PCR高齣1箇數量級.此法是齣入境檢疫VHSV的有效方法.
위건립준학실시지정량검측병독성출혈성패혈증병독(VHSV),재VHSV-N기인보수구설계료Taqman MGB탐침여인물대,수후,채용체외전록기술획득료VHSV-N기인RNA,병이차위절대정량표준품,건립료절대정량(AQ)검측VHSV적실시형광RT-PCR법(AQ-RT-PCR방법),병여세계동물위생조직(OIE)추천적보통RT-PCR법진행료비교.차형광RT-PCR법특이성호,여기타어류탄상병독무교차반응.검측선성범위위10~(10)～10~2고패/반응,령법도체10~2 고패/반응.차검측령민도비OIE추거적RT-PCR법고출5개수량급,비감투RT-PCR고출1개수량급.차법시출입경검역VHSV적유효방법.
