高技术通讯
高技術通訊
고기술통신
HIGH TECHNOLOGY LETTERS
2010年
2期
204-207
,共4页
张喆%姜鹏%杨锐%费修绠%唐学玺%秦松
張喆%薑鵬%楊銳%費脩綆%唐學璽%秦鬆
장철%강붕%양예%비수경%당학새%진송
紫菜%丝状体%基因枪%lacZ报告基因%SV40启动子
紫菜%絲狀體%基因鎗%lacZ報告基因%SV40啟動子
자채%사상체%기인창%lacZ보고기인%SV40계동자
Porphyra%concocelis%particle delivery system%lacZ reporter gene%SV40 promoter
以坛紫菜和条斑紫菜的自由丝状体为材料,利用基因枪法分别转化CaMV35S、SV40、FCP、Amt、Ubi 5种启动子与报告基因组合,转化后48h进行原位组织化学染色检测,首次针对重要经济红藻紫菜的自由丝状体建立并优化遗传转化技术,为紫菜研究提供了新工具.结果显示,SV40启动子可以驱动lacZ报告基因(编码β-半乳糖苷酶)在紫菜丝状体中的瞬间表达,空白与阴性对照未检测到本底;其它4种启动子未检测到基因表达.进一步优化实验发现,在可裂膜650psi、轰击距离6cm下获得最高转化效率为8.0×10~(-5),经定量检测与双因子方差分析,是最佳转化参数,提示基因枪参数对外源基因转化效率具显著影响.
以罈紫菜和條斑紫菜的自由絲狀體為材料,利用基因鎗法分彆轉化CaMV35S、SV40、FCP、Amt、Ubi 5種啟動子與報告基因組閤,轉化後48h進行原位組織化學染色檢測,首次針對重要經濟紅藻紫菜的自由絲狀體建立併優化遺傳轉化技術,為紫菜研究提供瞭新工具.結果顯示,SV40啟動子可以驅動lacZ報告基因(編碼β-半乳糖苷酶)在紫菜絲狀體中的瞬間錶達,空白與陰性對照未檢測到本底;其它4種啟動子未檢測到基因錶達.進一步優化實驗髮現,在可裂膜650psi、轟擊距離6cm下穫得最高轉化效率為8.0×10~(-5),經定量檢測與雙因子方差分析,是最佳轉化參數,提示基因鎗參數對外源基因轉化效率具顯著影響.
이단자채화조반자채적자유사상체위재료,이용기인창법분별전화CaMV35S、SV40、FCP、Amt、Ubi 5충계동자여보고기인조합,전화후48h진행원위조직화학염색검측,수차침대중요경제홍조자채적자유사상체건립병우화유전전화기술,위자채연구제공료신공구.결과현시,SV40계동자가이구동lacZ보고기인(편마β-반유당감매)재자채사상체중적순간표체,공백여음성대조미검측도본저;기타4충계동자미검측도기인표체.진일보우화실험발현,재가렬막650psi、굉격거리6cm하획득최고전화효솔위8.0×10~(-5),경정량검측여쌍인자방차분석,시최가전화삼수,제시기인창삼수대외원기인전화효솔구현저영향.
