解剖科学进展
解剖科學進展
해부과학진전
PROGRESS OF ANATOMICAL SCIENCES
2010年
1期
62-65,70
,共5页
高学军%贺召丽%孙伟%李佩瑞%蔡霞
高學軍%賀召麗%孫偉%李珮瑞%蔡霞
고학군%하소려%손위%리패서%채하
病毒白细胞介素-10%骨髓基质干细胞%大鼠
病毒白細胞介素-10%骨髓基質榦細胞%大鼠
병독백세포개소-10%골수기질간세포%대서
目的 构建携带免疫调节因子vIL-10cDNA的真核表达载体,转染至SD大鼠骨髓基质干细胞,观察免疫调节因子vIL-10在骨髓基质干细胞的表达.方法 PCR扩增原核载体PET-28α/vIL-10,获得目的 基因vIL-10,目的 基因在大肠杆菌中扩增后连入真核表达载体PcDNA3.1(+),转染大鼠骨髓基质干细胞.用G418筛选得到vIL-10高表达的细胞,对照组为pcDNA3.1(+)直接转染的骨髓基质干细胞.结果 经PCR、酶切、测序鉴定显示按设计构建的载体pcDNA3.1(+)-vIL-10,已成功转染骨髓基质干细胞.RT-PCR检测到510bp目的 片段vIL-10在骨髓基质干细胞表达,SDS-PAGE电泳表明在骨髓基质干细胞有vIL-10蛋白的表达.结论 vIL-10mRNA和蛋白在骨髓基质干细胞中表达.
目的 構建攜帶免疫調節因子vIL-10cDNA的真覈錶達載體,轉染至SD大鼠骨髓基質榦細胞,觀察免疫調節因子vIL-10在骨髓基質榦細胞的錶達.方法 PCR擴增原覈載體PET-28α/vIL-10,穫得目的 基因vIL-10,目的 基因在大腸桿菌中擴增後連入真覈錶達載體PcDNA3.1(+),轉染大鼠骨髓基質榦細胞.用G418篩選得到vIL-10高錶達的細胞,對照組為pcDNA3.1(+)直接轉染的骨髓基質榦細胞.結果 經PCR、酶切、測序鑒定顯示按設計構建的載體pcDNA3.1(+)-vIL-10,已成功轉染骨髓基質榦細胞.RT-PCR檢測到510bp目的 片段vIL-10在骨髓基質榦細胞錶達,SDS-PAGE電泳錶明在骨髓基質榦細胞有vIL-10蛋白的錶達.結論 vIL-10mRNA和蛋白在骨髓基質榦細胞中錶達.
목적 구건휴대면역조절인자vIL-10cDNA적진핵표체재체,전염지SD대서골수기질간세포,관찰면역조절인자vIL-10재골수기질간세포적표체.방법 PCR확증원핵재체PET-28α/vIL-10,획득목적 기인vIL-10,목적 기인재대장간균중확증후련입진핵표체재체PcDNA3.1(+),전염대서골수기질간세포.용G418사선득도vIL-10고표체적세포,대조조위pcDNA3.1(+)직접전염적골수기질간세포.결과 경PCR、매절、측서감정현시안설계구건적재체pcDNA3.1(+)-vIL-10,이성공전염골수기질간세포.RT-PCR검측도510bp목적 편단vIL-10재골수기질간세포표체,SDS-PAGE전영표명재골수기질간세포유vIL-10단백적표체.결론 vIL-10mRNA화단백재골수기질간세포중표체.
