临床误诊误治
臨床誤診誤治
림상오진오치
CLINICAL MISDIAGNOSIS & MISTHERAPY
2013年
10期
104-107
,共4页
陈晖%王磊%翁小东%刘修恒
陳暉%王磊%翁小東%劉脩恆
진휘%왕뢰%옹소동%류수항
缺血%印迹法,蛋白质%细胞凋亡
缺血%印跡法,蛋白質%細胞凋亡
결혈%인적법,단백질%세포조망
Ischemic%Blotting%Protein%Apoptosis
目的 研究缺血后处理对缺氧/复氧损伤后大鼠肾小管上皮细胞凋亡的影响.方法 应用NRK-52E建立有效的体外模型,实验分为对照组:应用对照缓冲液培养,3h后换完全培养基培养；缺血再灌注损伤组(IRI组):应用缺血缓冲液培养,3h后同样更换完全培养基培养；缺血后处理组(IPO组):应用缺血缓冲液培养3h,立即行体外缺血后处理,然后更换完全培养基.用流式细胞仪和Hoechst检测细胞凋亡.于3、6、12、24h后收集各组细胞,蛋白印迹法检测Bcl-2,Bax,Caspase-3,cleaved-Caspase-3和Caspase-8等蛋白水平.结果 在经历缺血3h后再灌注至24h后,IRI组和IPO组有明显细胞凋亡,但IPO组凋亡明显较IRI组减轻.IRI组和IPO组Bax,cleaved-Caspase-3,Caspase-8蛋白的表达都明显升高,但是IPO组表达较IRI组显著减轻(P＜0.05).结论 3h的体外缺血再灌注损伤可以诱导肾小管上皮细胞的凋亡,而缺血后处理能抑制凋亡,机制可能与通过抑制Caspase通路有关.
目的 研究缺血後處理對缺氧/複氧損傷後大鼠腎小管上皮細胞凋亡的影響.方法 應用NRK-52E建立有效的體外模型,實驗分為對照組:應用對照緩遲液培養,3h後換完全培養基培養；缺血再灌註損傷組(IRI組):應用缺血緩遲液培養,3h後同樣更換完全培養基培養；缺血後處理組(IPO組):應用缺血緩遲液培養3h,立即行體外缺血後處理,然後更換完全培養基.用流式細胞儀和Hoechst檢測細胞凋亡.于3、6、12、24h後收集各組細胞,蛋白印跡法檢測Bcl-2,Bax,Caspase-3,cleaved-Caspase-3和Caspase-8等蛋白水平.結果 在經歷缺血3h後再灌註至24h後,IRI組和IPO組有明顯細胞凋亡,但IPO組凋亡明顯較IRI組減輕.IRI組和IPO組Bax,cleaved-Caspase-3,Caspase-8蛋白的錶達都明顯升高,但是IPO組錶達較IRI組顯著減輕(P＜0.05).結論 3h的體外缺血再灌註損傷可以誘導腎小管上皮細胞的凋亡,而缺血後處理能抑製凋亡,機製可能與通過抑製Caspase通路有關.
목적 연구결혈후처리대결양/복양손상후대서신소관상피세포조망적영향.방법 응용NRK-52E건립유효적체외모형,실험분위대조조:응용대조완충액배양,3h후환완전배양기배양；결혈재관주손상조(IRI조):응용결혈완충액배양,3h후동양경환완전배양기배양；결혈후처리조(IPO조):응용결혈완충액배양3h,립즉행체외결혈후처리,연후경환완전배양기.용류식세포의화Hoechst검측세포조망.우3、6、12、24h후수집각조세포,단백인적법검측Bcl-2,Bax,Caspase-3,cleaved-Caspase-3화Caspase-8등단백수평.결과 재경력결혈3h후재관주지24h후,IRI조화IPO조유명현세포조망,단IPO조조망명현교IRI조감경.IRI조화IPO조Bax,cleaved-Caspase-3,Caspase-8단백적표체도명현승고,단시IPO조표체교IRI조현저감경(P＜0.05).결론 3h적체외결혈재관주손상가이유도신소관상피세포적조망,이결혈후처리능억제조망,궤제가능여통과억제Caspase통로유관.
