分析化学
分析化學
분석화학
CHINESE JOURNAL OF ANALYTICAL CHEMISTRY
2013年
10期
1555-1560
,共6页
王敏%张亮%张威%曹振%谭桂玉%南铁贵%王保民
王敏%張亮%張威%曹振%譚桂玉%南鐵貴%王保民
왕민%장량%장위%조진%담계옥%남철귀%왕보민
转基因作物%pat基因%pat蛋白%双抗夹心酶联免疫检测法
轉基因作物%pat基因%pat蛋白%雙抗夾心酶聯免疫檢測法
전기인작물%pat기인%pat단백%쌍항협심매련면역검측법
Genetically modified crops%Phosphinothricin acethl transferase gene%Sandwich enzyme-linked immunosorbent assy
将克隆到的pat基因构建原核表达载体pET30(+)-pat并在大肠杆菌中进行表达,分离纯化得到高纯度pat蛋白.用所得到的pat蛋白制备了兔多克隆抗体和鼠单抗2F6.多抗效价＞8000,单抗效价为5×104；单抗为IgG1类,轻链为K型.基于抗pat蛋白单克隆抗体和兔多克隆抗体建立了双抗夹心酶联免疫分析方法(Sandwich ELISA).检测范围为1.6 ～ 100μg/L,线性回归方程y=0.6914x-2.572,决定系数为0.9951.用所建立的方法测定了5个转基因抗虫棉和2个非转基因棉花品种叶片中pat蛋白的含量,其中转基因抗虫棉中的3个品种检测出pat蛋白,其余均未检出pat蛋白.
將剋隆到的pat基因構建原覈錶達載體pET30(+)-pat併在大腸桿菌中進行錶達,分離純化得到高純度pat蛋白.用所得到的pat蛋白製備瞭兔多剋隆抗體和鼠單抗2F6.多抗效價＞8000,單抗效價為5×104；單抗為IgG1類,輕鏈為K型.基于抗pat蛋白單剋隆抗體和兔多剋隆抗體建立瞭雙抗夾心酶聯免疫分析方法(Sandwich ELISA).檢測範圍為1.6 ～ 100μg/L,線性迴歸方程y=0.6914x-2.572,決定繫數為0.9951.用所建立的方法測定瞭5箇轉基因抗蟲棉和2箇非轉基因棉花品種葉片中pat蛋白的含量,其中轉基因抗蟲棉中的3箇品種檢測齣pat蛋白,其餘均未檢齣pat蛋白.
장극륭도적pat기인구건원핵표체재체pET30(+)-pat병재대장간균중진행표체,분리순화득도고순도pat단백.용소득도적pat단백제비료토다극륭항체화서단항2F6.다항효개＞8000,단항효개위5×104；단항위IgG1류,경련위K형.기우항pat단백단극륭항체화토다극륭항체건립료쌍항협심매련면역분석방법(Sandwich ELISA).검측범위위1.6 ～ 100μg/L,선성회귀방정y=0.6914x-2.572,결정계수위0.9951.용소건립적방법측정료5개전기인항충면화2개비전기인면화품충협편중pat단백적함량,기중전기인항충면중적3개품충검측출pat단백,기여균미검출pat단백.
