广西大学学报（自然科学版）
廣西大學學報（自然科學版）
엄서대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF GUANGXI UNIVERSITY （NATURAL SCIENCE EDITION）
2009年
z1期
374-378
,共5页
张华%韦香%陈相妤%唐纪良%唐东阶
張華%韋香%陳相妤%唐紀良%唐東階
장화%위향%진상여%당기량%당동계
萝卜%总RNA提取%Trizol法%异硫氰酸胍法%酸酚法
蘿蔔%總RNA提取%Trizol法%異硫氰痠胍法%痠酚法
라복%총RNA제취%Trizol법%이류청산고법%산분법
获得高质量的RNA是进行RNA相关分子生物学实验和研究的前提.尽管目前已建立了多种真核生物总RNA的提取方法,但这些方法是否适用于提取萝卜(Raphanus sativus L.Var.radiculus Pers.)的总RNA还不清楚.本研究分别采用Trizol法、改进的异硫氰酸胍法和改进的SDS--酸酚法提取萝卜叶片总RNA,并通过分析所得RNA的电泳图谱、得率和纯度来判断这三种方法的优劣, 确定了提取满身红萝卜总RNA的最适方法.实验结果表明,Trizol法和改进SDS酸酚法提取的总RNA中蛋白质和DNA污染比较严重,不能用于下一步实验;而改进的异硫氰酸胍法提取的总RNA得率高、纯度高、完整性好、少降解,完全适合用于Northern blotting,小RNA分离、cDNA文库的构建等分子生物学实验.
穫得高質量的RNA是進行RNA相關分子生物學實驗和研究的前提.儘管目前已建立瞭多種真覈生物總RNA的提取方法,但這些方法是否適用于提取蘿蔔(Raphanus sativus L.Var.radiculus Pers.)的總RNA還不清楚.本研究分彆採用Trizol法、改進的異硫氰痠胍法和改進的SDS--痠酚法提取蘿蔔葉片總RNA,併通過分析所得RNA的電泳圖譜、得率和純度來判斷這三種方法的優劣, 確定瞭提取滿身紅蘿蔔總RNA的最適方法.實驗結果錶明,Trizol法和改進SDS痠酚法提取的總RNA中蛋白質和DNA汙染比較嚴重,不能用于下一步實驗;而改進的異硫氰痠胍法提取的總RNA得率高、純度高、完整性好、少降解,完全適閤用于Northern blotting,小RNA分離、cDNA文庫的構建等分子生物學實驗.
획득고질량적RNA시진행RNA상관분자생물학실험화연구적전제.진관목전이건립료다충진핵생물총RNA적제취방법,단저사방법시부괄용우제취라복(Raphanus sativus L.Var.radiculus Pers.)적총RNA환불청초.본연구분별채용Trizol법、개진적이류청산고법화개진적SDS--산분법제취라복협편총RNA,병통과분석소득RNA적전영도보、득솔화순도래판단저삼충방법적우렬, 학정료제취만신홍라복총RNA적최괄방법.실험결과표명,Trizol법화개진SDS산분법제취적총RNA중단백질화DNA오염비교엄중,불능용우하일보실험;이개진적이류청산고법제취적총RNA득솔고、순도고、완정성호、소강해,완전괄합용우Northern blotting,소RNA분리、cDNA문고적구건등분자생물학실험.
