浙江大学学报(医学版)
浙江大學學報(醫學版)
절강대학학보(의학판)
JOURNAL OF ZHEJIANG UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCES)
2008年
4期
399-406
,共8页
胡艳芳%龚方戚%陈黎勤%顾卫忠
鬍豔芳%龔方慼%陳黎勤%顧衛忠
호염방%공방척%진려근%고위충
丙种球蛋白类/投药和剂量%抗坏血酸/投药和剂量%肿瘤坏死因子α/血液%心肌炎/药物疗法%心肌炎/病理学%自身免疫疾病/药物疗法%疾病模型,动物
丙種毬蛋白類/投藥和劑量%抗壞血痠/投藥和劑量%腫瘤壞死因子α/血液%心肌炎/藥物療法%心肌炎/病理學%自身免疫疾病/藥物療法%疾病模型,動物
병충구단백류/투약화제량%항배혈산/투약화제량%종류배사인자α/혈액%심기염/약물요법%심기염/병이학%자신면역질병/약물요법%질병모형,동물
目的:探讨丙种球蛋白(IVIG)和不同剂量维生素C(VitC)对实验性自身免疫性心肌爽(EAM)的保护作用.方法:Balb/c小鼠52只,随机分为6组:空白组不予任何处理;其余小鼠分别于第1天和第7天在双测腹股沟皮下注射充分乳化的猪心肌肌凝蛋白,荆量为每次每只100μg;从免疫的当天开始给每只小鼠腹腔注射所给药物.小剂量VitC组:150 mg/kg·d-1 VitC;大剂量VitC组:300 mg/kg·d-1VitC;IVIG组:1 g/kg·d-1IVIG;IVIG+VitC组:1g/kg·d-1IVIG和150mg/kg·d-1VitC;对照组:与干预组等量的生理盐水.小鼠于第21天给予称重,麻醉后处死,并摘眼球取血,用Elisa法测定血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;取心脏、脾脏和肾脏分别称重,得心脏、脾脏和肾脏与体重之比(C/W、S/W、R/W);脾脏在肉眼观察后作病理切片和H-E染色.心脏分为三部分:一部分作病理切片和H-E染色,一部分作冰冻切片,在荧光显微镜下用直接免疫荧光法测定心肌组织中沉积的IgG水平,一部分作电镜检查.结果:(1)心脏的病理改变:大、小剂量VitC组心肌炎性细胞的浸润及心包钙化有所减轻;IVIG组和IVIG+VitC组心肌偶有淋巴细胞浸润,无心包钙化.(2)脾脏的病理改变:除空白组外,其余脾脏均明显增大,IVIG组和IVIG+VitC组更是明显,镜检表现为红髓充血和白髓增生.(3)心脏、脾脏、肾脏与体重之比:各干预组C/W明显低于对照组;各干预组和对照组S/W明显高于空白组,IVIG组和IVIG+VitC组S/W明显高于大、小剂量VitC组;R/W各组无差异.(4)TNF-α水平:大、小剂量VitC组的TNF-α水平略低于对照组,IVIG组和IVIG+VitC组的TNF-α水平明显低于对照组.(5)心肌的免疫荧光检测:对照组比较粗的荧光条带主要集中在心肌间质,大、小剂量VitC组荧光的密度和强度有所降低,而IVIG组和IVIG+VitC组的荧光条带增宽,在心肌间质中呈宽大的条索状分布,亮度明显增强.(6)心肌的电镜检测:对照组心肌肌丝排列紊乱,肌节断裂严重,线粒体肥大,并出现空泡变性;大、小剂量VitC组病变比对照组有所减轻;IVIG组和IVIG+VitC组肌丝排列紊乱明显减轻,肌节断裂比对照组减少,线粒体基本正常.结论.IVIG和VitC对EAM都有一定的保护作用,可以减轻心脏的病理改变,抑制TNF-α的产生;但IVIG或IVIG+VitC作用更为明显,并可刺激机体的免疫反应,增加心肌中IgG的沉积.
目的:探討丙種毬蛋白(IVIG)和不同劑量維生素C(VitC)對實驗性自身免疫性心肌爽(EAM)的保護作用.方法:Balb/c小鼠52隻,隨機分為6組:空白組不予任何處理;其餘小鼠分彆于第1天和第7天在雙測腹股溝皮下註射充分乳化的豬心肌肌凝蛋白,荊量為每次每隻100μg;從免疫的噹天開始給每隻小鼠腹腔註射所給藥物.小劑量VitC組:150 mg/kg·d-1 VitC;大劑量VitC組:300 mg/kg·d-1VitC;IVIG組:1 g/kg·d-1IVIG;IVIG+VitC組:1g/kg·d-1IVIG和150mg/kg·d-1VitC;對照組:與榦預組等量的生理鹽水.小鼠于第21天給予稱重,痳醉後處死,併摘眼毬取血,用Elisa法測定血清腫瘤壞死因子α(TNF-α)水平;取心髒、脾髒和腎髒分彆稱重,得心髒、脾髒和腎髒與體重之比(C/W、S/W、R/W);脾髒在肉眼觀察後作病理切片和H-E染色.心髒分為三部分:一部分作病理切片和H-E染色,一部分作冰凍切片,在熒光顯微鏡下用直接免疫熒光法測定心肌組織中沉積的IgG水平,一部分作電鏡檢查.結果:(1)心髒的病理改變:大、小劑量VitC組心肌炎性細胞的浸潤及心包鈣化有所減輕;IVIG組和IVIG+VitC組心肌偶有淋巴細胞浸潤,無心包鈣化.(2)脾髒的病理改變:除空白組外,其餘脾髒均明顯增大,IVIG組和IVIG+VitC組更是明顯,鏡檢錶現為紅髓充血和白髓增生.(3)心髒、脾髒、腎髒與體重之比:各榦預組C/W明顯低于對照組;各榦預組和對照組S/W明顯高于空白組,IVIG組和IVIG+VitC組S/W明顯高于大、小劑量VitC組;R/W各組無差異.(4)TNF-α水平:大、小劑量VitC組的TNF-α水平略低于對照組,IVIG組和IVIG+VitC組的TNF-α水平明顯低于對照組.(5)心肌的免疫熒光檢測:對照組比較粗的熒光條帶主要集中在心肌間質,大、小劑量VitC組熒光的密度和彊度有所降低,而IVIG組和IVIG+VitC組的熒光條帶增寬,在心肌間質中呈寬大的條索狀分佈,亮度明顯增彊.(6)心肌的電鏡檢測:對照組心肌肌絲排列紊亂,肌節斷裂嚴重,線粒體肥大,併齣現空泡變性;大、小劑量VitC組病變比對照組有所減輕;IVIG組和IVIG+VitC組肌絲排列紊亂明顯減輕,肌節斷裂比對照組減少,線粒體基本正常.結論.IVIG和VitC對EAM都有一定的保護作用,可以減輕心髒的病理改變,抑製TNF-α的產生;但IVIG或IVIG+VitC作用更為明顯,併可刺激機體的免疫反應,增加心肌中IgG的沉積.
목적:탐토병충구단백(IVIG)화불동제량유생소C(VitC)대실험성자신면역성심기상(EAM)적보호작용.방법:Balb/c소서52지,수궤분위6조:공백조불여임하처리;기여소서분별우제1천화제7천재쌍측복고구피하주사충분유화적저심기기응단백,형량위매차매지100μg;종면역적당천개시급매지소서복강주사소급약물.소제량VitC조:150 mg/kg·d-1 VitC;대제량VitC조:300 mg/kg·d-1VitC;IVIG조:1 g/kg·d-1IVIG;IVIG+VitC조:1g/kg·d-1IVIG화150mg/kg·d-1VitC;대조조:여간예조등량적생리염수.소서우제21천급여칭중,마취후처사,병적안구취혈,용Elisa법측정혈청종류배사인자α(TNF-α)수평;취심장、비장화신장분별칭중,득심장、비장화신장여체중지비(C/W、S/W、R/W);비장재육안관찰후작병리절편화H-E염색.심장분위삼부분:일부분작병리절편화H-E염색,일부분작빙동절편,재형광현미경하용직접면역형광법측정심기조직중침적적IgG수평,일부분작전경검사.결과:(1)심장적병리개변:대、소제량VitC조심기염성세포적침윤급심포개화유소감경;IVIG조화IVIG+VitC조심기우유림파세포침윤,무심포개화.(2)비장적병리개변:제공백조외,기여비장균명현증대,IVIG조화IVIG+VitC조경시명현,경검표현위홍수충혈화백수증생.(3)심장、비장、신장여체중지비:각간예조C/W명현저우대조조;각간예조화대조조S/W명현고우공백조,IVIG조화IVIG+VitC조S/W명현고우대、소제량VitC조;R/W각조무차이.(4)TNF-α수평:대、소제량VitC조적TNF-α수평략저우대조조,IVIG조화IVIG+VitC조적TNF-α수평명현저우대조조.(5)심기적면역형광검측:대조조비교조적형광조대주요집중재심기간질,대、소제량VitC조형광적밀도화강도유소강저,이IVIG조화IVIG+VitC조적형광조대증관,재심기간질중정관대적조색상분포,량도명현증강.(6)심기적전경검측:대조조심기기사배렬문란,기절단렬엄중,선립체비대,병출현공포변성;대、소제량VitC조병변비대조조유소감경;IVIG조화IVIG+VitC조기사배렬문란명현감경,기절단렬비대조조감소,선립체기본정상.결론.IVIG화VitC대EAM도유일정적보호작용,가이감경심장적병리개변,억제TNF-α적산생;단IVIG혹IVIG+VitC작용경위명현,병가자격궤체적면역반응,증가심기중IgG적침적.