浙江大学学报(医学版)
浙江大學學報(醫學版)
절강대학학보(의학판)
JOURNAL OF ZHEJIANG UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCES)
2008年
4期
373-380
,共8页
孔敏坚%董爱强%马志原%程海峰%钱建芳%范军强
孔敏堅%董愛彊%馬誌原%程海峰%錢建芳%範軍彊
공민견%동애강%마지원%정해봉%전건방%범군강
癌,非小细胞肺/病理学%胰岛素样生长因子I类受体%RNA干扰%化疗敏感性%凋亡
癌,非小細胞肺/病理學%胰島素樣生長因子I類受體%RNA榦擾%化療敏感性%凋亡
암,비소세포폐/병이학%이도소양생장인자I류수체%RNA간우%화료민감성%조망
目的:评价RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术,对人肺癌A549细胞系中胰岛素样生长因子Ⅰ类受体(IGF-I R)表达的阻断效应,和IGF-I R基因沉默后细胞增殖、凋亡等生物学特性及肿瘤细胞对化疗药物敏感性的改变.方珐:应用U6启动子,介导DNA模板转录生成短发夹样RNA(shRNA),并转染人肺癌A549细胞株,从而产生IGF-I R特异性小干扰RNA(siRNA),经RT-PCR和Western blot检测IGF-I R表达的改变;联合应用化疗药物顺铂(DDP),通过MTT法和流式细胞技术等,观察细胞生长、细胞周期、细胞凋亡及DDP半数致死量(IC50)的变化.结果:IGF-I R表达水平明显下降(抑制率高达89.8%),肿瘤细胞增殖能力明显减弱,细胞滞留于G0期的比例上升;DDP对肿瘤细胞24 h、48 h、72 h的IC50均明显减少,IGF-I R siRNAl组DDP作用72h的IC50为0.92 mg/L,明显低于control-siRNA组的3.77 mg/L,0.5 mg/L DDP联合IGF-I R siRNAl作用48 h后,A549细胞的生长抑制率达32.1%,明显高于control-siRNA组的18.9%,细胞凋亡率从27.8%上升至44.2%.结论:运用RNAi技术能有效抑制A549细胞IGF-I R的表达,使细胞增殖能力减弱,化疗敏感性增加.
目的:評價RNA榦擾(RNA interference,RNAi)技術,對人肺癌A549細胞繫中胰島素樣生長因子Ⅰ類受體(IGF-I R)錶達的阻斷效應,和IGF-I R基因沉默後細胞增殖、凋亡等生物學特性及腫瘤細胞對化療藥物敏感性的改變.方琺:應用U6啟動子,介導DNA模闆轉錄生成短髮夾樣RNA(shRNA),併轉染人肺癌A549細胞株,從而產生IGF-I R特異性小榦擾RNA(siRNA),經RT-PCR和Western blot檢測IGF-I R錶達的改變;聯閤應用化療藥物順鉑(DDP),通過MTT法和流式細胞技術等,觀察細胞生長、細胞週期、細胞凋亡及DDP半數緻死量(IC50)的變化.結果:IGF-I R錶達水平明顯下降(抑製率高達89.8%),腫瘤細胞增殖能力明顯減弱,細胞滯留于G0期的比例上升;DDP對腫瘤細胞24 h、48 h、72 h的IC50均明顯減少,IGF-I R siRNAl組DDP作用72h的IC50為0.92 mg/L,明顯低于control-siRNA組的3.77 mg/L,0.5 mg/L DDP聯閤IGF-I R siRNAl作用48 h後,A549細胞的生長抑製率達32.1%,明顯高于control-siRNA組的18.9%,細胞凋亡率從27.8%上升至44.2%.結論:運用RNAi技術能有效抑製A549細胞IGF-I R的錶達,使細胞增殖能力減弱,化療敏感性增加.
목적:평개RNA간우(RNA interference,RNAi)기술,대인폐암A549세포계중이도소양생장인자Ⅰ류수체(IGF-I R)표체적조단효응,화IGF-I R기인침묵후세포증식、조망등생물학특성급종류세포대화료약물민감성적개변.방법:응용U6계동자,개도DNA모판전록생성단발협양RNA(shRNA),병전염인폐암A549세포주,종이산생IGF-I R특이성소간우RNA(siRNA),경RT-PCR화Western blot검측IGF-I R표체적개변;연합응용화료약물순박(DDP),통과MTT법화류식세포기술등,관찰세포생장、세포주기、세포조망급DDP반수치사량(IC50)적변화.결과:IGF-I R표체수평명현하강(억제솔고체89.8%),종류세포증식능력명현감약,세포체류우G0기적비례상승;DDP대종류세포24 h、48 h、72 h적IC50균명현감소,IGF-I R siRNAl조DDP작용72h적IC50위0.92 mg/L,명현저우control-siRNA조적3.77 mg/L,0.5 mg/L DDP연합IGF-I R siRNAl작용48 h후,A549세포적생장억제솔체32.1%,명현고우control-siRNA조적18.9%,세포조망솔종27.8%상승지44.2%.결론:운용RNAi기술능유효억제A549세포IGF-I R적표체,사세포증식능력감약,화료민감성증가.
