浙江大学学报（医学版）
浙江大學學報（醫學版）
절강대학학보（의학판）
JOURNAL OF ZHEJIANG UNIVERSITY MEDICAL SCIENCES
2013年
3期
276-282
,共7页
何萍%谭丽%胡薇薇%戴海斌%胡永洲%陈忠
何萍%譚麗%鬍薇薇%戴海斌%鬍永洲%陳忠
하평%담려%호미미%대해빈%호영주%진충
环AMP%受体,组胺H3%组胺H3拮抗剂%咪唑类%转染%基因%基因表达%逆转录聚合酶链反应%免疫印迹法
環AMP%受體,組胺H3%組胺H3拮抗劑%咪唑類%轉染%基因%基因錶達%逆轉錄聚閤酶鏈反應%免疫印跡法
배AMP%수체,조알H3%조알H3길항제%미서류%전염%기인%기인표체%역전록취합매련반응%면역인적법
Cyclic AMP%Receptors,histamine H3%Histamine H3 antagonists%Imidazoles%Transfection%Genes%Gene expression%Reverse transcriptase polymerase chain reaction%Immunoblotting
目的:鉴定转染大鼠组胺H3受体基因的HEK293细胞株受体表达情况,筛选具有H3受体拮抗活性的新型非咪唑类化合物.方法:利用RT-PCR和免疫印迹的方法检测转染细胞株组胺H3受体的表达,以阳性刺激物forskolin诱导细胞内cAMP含量升高为指标,初步筛选具有拮抗作用的化合物.结果:细胞鉴定结果显示,稳定转染H3受体基因的HEK293细胞株高表达大鼠H3受体.H3受体选择性激动剂(R)-α-甲基组胺可浓度依赖性抑制阳性刺激物forskolin(10 μmol/L)诱导的cAMP含量升高(P＜0.05),当(R)-α-甲基组胺浓度达到30 nmol/L时,抑制率接近平台值(P＞0.05).而H3受体拮抗剂噻普酰胺和新合成的非咪唑类化合物XHA23及XHA25则能够浓度依赖性阻断(R)-α-甲基组胺对forskolin诱导的cAMP含量升高的抑制作用(P＜0.05),IC50分别为3.62 μmol/L、0.49 μmol/L、0.14 μmol/L.结论:高表达H3受体的HEK293细胞株可用于有H3受体拮抗活性化合物的筛选,而非咪唑类化合物XHA23和XHA25具有一定的H3受体拮抗剂样活性.
目的:鑒定轉染大鼠組胺H3受體基因的HEK293細胞株受體錶達情況,篩選具有H3受體拮抗活性的新型非咪唑類化閤物.方法:利用RT-PCR和免疫印跡的方法檢測轉染細胞株組胺H3受體的錶達,以暘性刺激物forskolin誘導細胞內cAMP含量升高為指標,初步篩選具有拮抗作用的化閤物.結果:細胞鑒定結果顯示,穩定轉染H3受體基因的HEK293細胞株高錶達大鼠H3受體.H3受體選擇性激動劑(R)-α-甲基組胺可濃度依賴性抑製暘性刺激物forskolin(10 μmol/L)誘導的cAMP含量升高(P＜0.05),噹(R)-α-甲基組胺濃度達到30 nmol/L時,抑製率接近平檯值(P＞0.05).而H3受體拮抗劑噻普酰胺和新閤成的非咪唑類化閤物XHA23及XHA25則能夠濃度依賴性阻斷(R)-α-甲基組胺對forskolin誘導的cAMP含量升高的抑製作用(P＜0.05),IC50分彆為3.62 μmol/L、0.49 μmol/L、0.14 μmol/L.結論:高錶達H3受體的HEK293細胞株可用于有H3受體拮抗活性化閤物的篩選,而非咪唑類化閤物XHA23和XHA25具有一定的H3受體拮抗劑樣活性.
목적:감정전염대서조알H3수체기인적HEK293세포주수체표체정황,사선구유H3수체길항활성적신형비미서류화합물.방법:이용RT-PCR화면역인적적방법검측전염세포주조알H3수체적표체,이양성자격물forskolin유도세포내cAMP함량승고위지표,초보사선구유길항작용적화합물.결과:세포감정결과현시,은정전염H3수체기인적HEK293세포주고표체대서H3수체.H3수체선택성격동제(R)-α-갑기조알가농도의뢰성억제양성자격물forskolin(10 μmol/L)유도적cAMP함량승고(P＜0.05),당(R)-α-갑기조알농도체도30 nmol/L시,억제솔접근평태치(P＞0.05).이H3수체길항제새보선알화신합성적비미서류화합물XHA23급XHA25칙능구농도의뢰성조단(R)-α-갑기조알대forskolin유도적cAMP함량승고적억제작용(P＜0.05),IC50분별위3.62 μmol/L、0.49 μmol/L、0.14 μmol/L.결론:고표체H3수체적HEK293세포주가용우유H3수체길항활성화합물적사선,이비미서류화합물XHA23화XHA25구유일정적H3수체길항제양활성.
