中山大学学报(医学科学版)
中山大學學報(醫學科學版)
중산대학학보(의학과학판)
JOURNAL OF SUN YAT-SEN UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCES)
2013年
3期
446-450
,共5页
谢钧韬%周祎%高文宗%商梅娇%周李
謝鈞韜%週祎%高文宗%商梅嬌%週李
사균도%주의%고문종%상매교%주리
外切体%羊水%胎儿%肾%产前诊断
外切體%羊水%胎兒%腎%產前診斷
외절체%양수%태인%신%산전진단
exosome%amniotic fluid%fetus%kidney%prenatal diagnosis
[目的]分离鉴定羊水中的外切体,并测定羊水外切体中RNA的浓度,探讨从羊水外切体中提取RNA的可行性,从而进一步为胎儿肾脏疾病产前诊断和胎儿肾功能监测寻找生物指标提供研究基础.[方法]对8例妊娠22~30周并有产前诊断指征的孕妇分别采用常规羊膜腔穿刺术收集到羊水10 mL进行检测分析,通过多步离心法及蔗糖密度梯度离心法提取羊水中的外切体,采用透射电镜、流式细胞术及激光共聚焦对其进行鉴定,trizol法对分离到的外切体进行RNA提取,紫外分光光度计测定其RNA浓度.[结果]透射电镜结果示微囊小体形态均一、大小相近,直径范围40~100 nm,呈外切体典型的杯状结构,由脂质双层膜包裹的扁平球体,其外周及内含物均可见负染效应;流式细胞仪上可见CD24阳性率为(92.23±3.8)%;共聚焦显微镜下进行检测,于胶珠表面可见到荧光带;紫外分光光度计测得的RNA浓度分别为28.67、30.02、37.57、21.08、49.41、24.57、24.24、26.77 ng/μL,平均浓度为30.29 ng/μL.[结论]羊水中含有外切体,且其表面CD24分子阳性,说明其来源于胎儿肾脏.羊水中外切体含有RNA,由羊水中分离外切体并提取RNA可为进一步对胎儿肾脏疾病的产前诊断和胎儿肾功能的监测寻找生物指标提供基础材料.
[目的]分離鑒定羊水中的外切體,併測定羊水外切體中RNA的濃度,探討從羊水外切體中提取RNA的可行性,從而進一步為胎兒腎髒疾病產前診斷和胎兒腎功能鑑測尋找生物指標提供研究基礎.[方法]對8例妊娠22~30週併有產前診斷指徵的孕婦分彆採用常規羊膜腔穿刺術收集到羊水10 mL進行檢測分析,通過多步離心法及蔗糖密度梯度離心法提取羊水中的外切體,採用透射電鏡、流式細胞術及激光共聚焦對其進行鑒定,trizol法對分離到的外切體進行RNA提取,紫外分光光度計測定其RNA濃度.[結果]透射電鏡結果示微囊小體形態均一、大小相近,直徑範圍40~100 nm,呈外切體典型的杯狀結構,由脂質雙層膜包裹的扁平毬體,其外週及內含物均可見負染效應;流式細胞儀上可見CD24暘性率為(92.23±3.8)%;共聚焦顯微鏡下進行檢測,于膠珠錶麵可見到熒光帶;紫外分光光度計測得的RNA濃度分彆為28.67、30.02、37.57、21.08、49.41、24.57、24.24、26.77 ng/μL,平均濃度為30.29 ng/μL.[結論]羊水中含有外切體,且其錶麵CD24分子暘性,說明其來源于胎兒腎髒.羊水中外切體含有RNA,由羊水中分離外切體併提取RNA可為進一步對胎兒腎髒疾病的產前診斷和胎兒腎功能的鑑測尋找生物指標提供基礎材料.
[목적]분리감정양수중적외절체,병측정양수외절체중RNA적농도,탐토종양수외절체중제취RNA적가행성,종이진일보위태인신장질병산전진단화태인신공능감측심조생물지표제공연구기출.[방법]대8례임신22~30주병유산전진단지정적잉부분별채용상규양막강천자술수집도양수10 mL진행검측분석,통과다보리심법급자당밀도제도리심법제취양수중적외절체,채용투사전경、류식세포술급격광공취초대기진행감정,trizol법대분리도적외절체진행RNA제취,자외분광광도계측정기RNA농도.[결과]투사전경결과시미낭소체형태균일、대소상근,직경범위40~100 nm,정외절체전형적배상결구,유지질쌍층막포과적편평구체,기외주급내함물균가견부염효응;류식세포의상가견CD24양성솔위(92.23±3.8)%;공취초현미경하진행검측,우효주표면가견도형광대;자외분광광도계측득적RNA농도분별위28.67、30.02、37.57、21.08、49.41、24.57、24.24、26.77 ng/μL,평균농도위30.29 ng/μL.[결론]양수중함유외절체,차기표면CD24분자양성,설명기래원우태인신장.양수중외절체함유RNA,유양수중분리외절체병제취RNA가위진일보대태인신장질병적산전진단화태인신공능적감측심조생물지표제공기출재료.