浙江大学学报（医学版）
浙江大學學報（醫學版）
절강대학학보（의학판）
JOURNAL OF ZHEJIANG UNIVERSITY MEDICAL SCIENCES
2013年
3期
311-318
,共8页
子宫内膜/细胞学%干细胞%细胞,培养的%免疫磁化分离%流式细胞术%细胞培养技术/方法
子宮內膜/細胞學%榦細胞%細胞,培養的%免疫磁化分離%流式細胞術%細胞培養技術/方法
자궁내막/세포학%간세포%세포,배양적%면역자화분리%류식세포술%세포배양기술/방법
Endometrium/cytology%Stem cells%Cells,cultured%Immunomagnetic separation%Flow cytometry%Cell culture techniques/methods
目的:通过体外分离、培养子宫内膜基质干细胞,观察其生物学特性,探索一种简便、高效的分离培养人子宫内膜基质干细胞的方法.方法:取10例因子宫肌瘤行全子宫切除术患者的内膜组织标本,磁珠分选及克隆形成实验法分选子宫内膜基质干细胞,传代培养.流式细胞仪检测原代细胞表面标记,MTT法观察基质干细胞体外增殖情况；体外向成骨、成脂诱导分化,茜素红和油红O染色鉴定细胞分化能力,RT-PCR测定骨细胞和脂肪细胞特异性基因表达.同时检测基质干细胞表达胚胎时期标志蛋白OCT-4的情况.结果:通过该方法可获得子宫内膜基质干细胞,细胞易于贴壁,生长良好,传代稳定.细胞CD90和CD105表达阳性而CD45和CD34表达阴性.细胞周期的S期和G2-M期细胞比例高,细胞生长曲线呈“S”形.经成骨及成脂诱导后茜素红和油红O染色分别呈阳性反应,成骨及成脂标志性基因表达阳性.此外,免疫细胞化学染色显示OCT-4表达阳性.结论:子宫内膜基质干细胞具有间充质干细胞特性,来源广、易获取,可作为组织工程种子细胞来源.
目的:通過體外分離、培養子宮內膜基質榦細胞,觀察其生物學特性,探索一種簡便、高效的分離培養人子宮內膜基質榦細胞的方法.方法:取10例因子宮肌瘤行全子宮切除術患者的內膜組織標本,磁珠分選及剋隆形成實驗法分選子宮內膜基質榦細胞,傳代培養.流式細胞儀檢測原代細胞錶麵標記,MTT法觀察基質榦細胞體外增殖情況；體外嚮成骨、成脂誘導分化,茜素紅和油紅O染色鑒定細胞分化能力,RT-PCR測定骨細胞和脂肪細胞特異性基因錶達.同時檢測基質榦細胞錶達胚胎時期標誌蛋白OCT-4的情況.結果:通過該方法可穫得子宮內膜基質榦細胞,細胞易于貼壁,生長良好,傳代穩定.細胞CD90和CD105錶達暘性而CD45和CD34錶達陰性.細胞週期的S期和G2-M期細胞比例高,細胞生長麯線呈“S”形.經成骨及成脂誘導後茜素紅和油紅O染色分彆呈暘性反應,成骨及成脂標誌性基因錶達暘性.此外,免疫細胞化學染色顯示OCT-4錶達暘性.結論:子宮內膜基質榦細胞具有間充質榦細胞特性,來源廣、易穫取,可作為組織工程種子細胞來源.
목적:통과체외분리、배양자궁내막기질간세포,관찰기생물학특성,탐색일충간편、고효적분리배양인자궁내막기질간세포적방법.방법:취10례인자궁기류행전자궁절제술환자적내막조직표본,자주분선급극륭형성실험법분선자궁내막기질간세포,전대배양.류식세포의검측원대세포표면표기,MTT법관찰기질간세포체외증식정황；체외향성골、성지유도분화,천소홍화유홍O염색감정세포분화능력,RT-PCR측정골세포화지방세포특이성기인표체.동시검측기질간세포표체배태시기표지단백OCT-4적정황.결과:통과해방법가획득자궁내막기질간세포,세포역우첩벽,생장량호,전대은정.세포CD90화CD105표체양성이CD45화CD34표체음성.세포주기적S기화G2-M기세포비례고,세포생장곡선정“S”형.경성골급성지유도후천소홍화유홍O염색분별정양성반응,성골급성지표지성기인표체양성.차외,면역세포화학염색현시OCT-4표체양성.결론:자궁내막기질간세포구유간충질간세포특성,래원엄、역획취,가작위조직공정충자세포래원.
