临床与实验病理学杂志
臨床與實驗病理學雜誌
림상여실험병이학잡지
CHINESE JOURNAL OF CLINICAL AND EXPERIMENTAL PATHOLOGY
2012年
4期
422-428
,共7页
王晓玫%张石芬%成志强%彭全洲%胡锦涛%高利昆%许静%金红涛
王曉玫%張石芬%成誌彊%彭全洲%鬍錦濤%高利昆%許靜%金紅濤
왕효매%장석분%성지강%팽전주%호금도%고리곤%허정%금홍도
髓母细胞瘤%miR-383%D341细胞系%PRDX3%细胞功能
髓母細胞瘤%miR-383%D341細胞繫%PRDX3%細胞功能
수모세포류%miR-383%D341세포계%PRDX3%세포공능
目的 探讨microRNA-383(miR-383)对人髓母细胞瘤D341细胞系中PRDX3基因的表达及细胞增殖活性与凋亡等细胞功能学的影响.方法 应用实时荧光定量PCR法检测人髓母细胞瘤D341细胞系、正常脑组织中miR-383及PRDX3 mRNA表达水平;采用Western blot法检测人髓母细胞瘤D341细胞系、正常脑组织中PRDX3基因、蛋白表达水平;人工合成miR-383模拟体(mimics)转染MBD341细胞系,采用cck-8法、流式细胞术等实验方法检测转染人髓母细胞瘤D341细胞系后各组D341细胞增殖与凋亡、细胞内活性氧水平、线粒体膜电位水平的变化.结果 人髓母细胞瘤BD341细胞系中miR-383表达水平为正常脑组织的0.524倍,明显下调.而PRDX3基因mRNA表达水平为正常脑组织的5.214倍,蛋白表达水平较正常脑组织明显上调.miR-383 mimics转染D341细胞系24、48 h,实验组miR-383表达水平均明显高于空白对照组,且48 h作用更加明显;而PRDX3基因mRNA、蛋白表达水平48 h较空白对照组降低.cck-8法检测提示实验组中细胞增殖率降低(P<0.05).AnnexinV-FITC法检测转染后24、48 h细胞凋亡结果显示miR-383 mimics实验组细胞早期凋亡率明显增高,且24 h作用较明显(P=0.000).细胞内活性氧水平和线粒体膜电位水平检测结果分别显示,转染后24、48 h实验组较对照组细胞内活性氧水平明显升高,而线粒体膜电位水平较对照组明显降低.结论 与正常脑组织相比,miR-383在人髓母细胞瘤D341细胞系中表达降低,PRDX3基因表达升高.上调miR-383可敲低D341细胞系中PRDX3基因表达,并可抑制D341细胞增殖活性,促进D341细胞凋亡,出现D341细胞内活性氧水平升高、线粒体膜电位水平降低的细胞功能学变化.
目的 探討microRNA-383(miR-383)對人髓母細胞瘤D341細胞繫中PRDX3基因的錶達及細胞增殖活性與凋亡等細胞功能學的影響.方法 應用實時熒光定量PCR法檢測人髓母細胞瘤D341細胞繫、正常腦組織中miR-383及PRDX3 mRNA錶達水平;採用Western blot法檢測人髓母細胞瘤D341細胞繫、正常腦組織中PRDX3基因、蛋白錶達水平;人工閤成miR-383模擬體(mimics)轉染MBD341細胞繫,採用cck-8法、流式細胞術等實驗方法檢測轉染人髓母細胞瘤D341細胞繫後各組D341細胞增殖與凋亡、細胞內活性氧水平、線粒體膜電位水平的變化.結果 人髓母細胞瘤BD341細胞繫中miR-383錶達水平為正常腦組織的0.524倍,明顯下調.而PRDX3基因mRNA錶達水平為正常腦組織的5.214倍,蛋白錶達水平較正常腦組織明顯上調.miR-383 mimics轉染D341細胞繫24、48 h,實驗組miR-383錶達水平均明顯高于空白對照組,且48 h作用更加明顯;而PRDX3基因mRNA、蛋白錶達水平48 h較空白對照組降低.cck-8法檢測提示實驗組中細胞增殖率降低(P<0.05).AnnexinV-FITC法檢測轉染後24、48 h細胞凋亡結果顯示miR-383 mimics實驗組細胞早期凋亡率明顯增高,且24 h作用較明顯(P=0.000).細胞內活性氧水平和線粒體膜電位水平檢測結果分彆顯示,轉染後24、48 h實驗組較對照組細胞內活性氧水平明顯升高,而線粒體膜電位水平較對照組明顯降低.結論 與正常腦組織相比,miR-383在人髓母細胞瘤D341細胞繫中錶達降低,PRDX3基因錶達升高.上調miR-383可敲低D341細胞繫中PRDX3基因錶達,併可抑製D341細胞增殖活性,促進D341細胞凋亡,齣現D341細胞內活性氧水平升高、線粒體膜電位水平降低的細胞功能學變化.
목적 탐토microRNA-383(miR-383)대인수모세포류D341세포계중PRDX3기인적표체급세포증식활성여조망등세포공능학적영향.방법 응용실시형광정량PCR법검측인수모세포류D341세포계、정상뇌조직중miR-383급PRDX3 mRNA표체수평;채용Western blot법검측인수모세포류D341세포계、정상뇌조직중PRDX3기인、단백표체수평;인공합성miR-383모의체(mimics)전염MBD341세포계,채용cck-8법、류식세포술등실험방법검측전염인수모세포류D341세포계후각조D341세포증식여조망、세포내활성양수평、선립체막전위수평적변화.결과 인수모세포류BD341세포계중miR-383표체수평위정상뇌조직적0.524배,명현하조.이PRDX3기인mRNA표체수평위정상뇌조직적5.214배,단백표체수평교정상뇌조직명현상조.miR-383 mimics전염D341세포계24、48 h,실험조miR-383표체수평균명현고우공백대조조,차48 h작용경가명현;이PRDX3기인mRNA、단백표체수평48 h교공백대조조강저.cck-8법검측제시실험조중세포증식솔강저(P<0.05).AnnexinV-FITC법검측전염후24、48 h세포조망결과현시miR-383 mimics실험조세포조기조망솔명현증고,차24 h작용교명현(P=0.000).세포내활성양수평화선립체막전위수평검측결과분별현시,전염후24、48 h실험조교대조조세포내활성양수평명현승고,이선립체막전위수평교대조조명현강저.결론 여정상뇌조직상비,miR-383재인수모세포류D341세포계중표체강저,PRDX3기인표체승고.상조miR-383가고저D341세포계중PRDX3기인표체,병가억제D341세포증식활성,촉진D341세포조망,출현D341세포내활성양수평승고、선립체막전위수평강저적세포공능학변화.
