植物病理学报
植物病理學報
식물병이학보
ACTA PHYTOPATHOLOGICA SINICA
2013年
2期
149-156
,共8页
石磊%杜锦锦%郭庆港%李宝庆%鹿秀云%李社增%马平
石磊%杜錦錦%郭慶港%李寶慶%鹿秀雲%李社增%馬平
석뢰%두금금%곽경항%리보경%록수운%리사증%마평
萎缩芽胞杆菌%生防菌%几丁质酶%基因克隆%原核表达
萎縮芽胞桿菌%生防菌%幾丁質酶%基因剋隆%原覈錶達
위축아포간균%생방균%궤정질매%기인극륭%원핵표체
本研究通过平板透明圈法筛选获得一株具有几丁质酶活性的生防细菌CAB-1,该菌株对番茄灰霉病菌等多种病原真菌表现较强的拮抗活性.通过生理生化、16S rDNA和gyrB基因序列测定,将菌株CAB-1鉴定为萎缩芽胞杆菌(Bacillus atrophaeus).对菌株CAB-1全基因组序列进行分析和功能预测,发现该菌株存在2个几丁质酶编码基因chit1和chit2.通过PCR技术从菌株CAB-1中克隆出这两个几丁质酶的编码基因并在大肠杆菌中表达,其原核表达产物均表现几丁质酶活性,其中chit1的原核表达产物能够显著抑制灰霉菌分生孢子的萌发.对其原核表达条件进行优化,发现在30℃下振荡培养24h,IPTG浓度为0.2～ 1.0 mmol/L时,其蛋白表达量最高.
本研究通過平闆透明圈法篩選穫得一株具有幾丁質酶活性的生防細菌CAB-1,該菌株對番茄灰黴病菌等多種病原真菌錶現較彊的拮抗活性.通過生理生化、16S rDNA和gyrB基因序列測定,將菌株CAB-1鑒定為萎縮芽胞桿菌(Bacillus atrophaeus).對菌株CAB-1全基因組序列進行分析和功能預測,髮現該菌株存在2箇幾丁質酶編碼基因chit1和chit2.通過PCR技術從菌株CAB-1中剋隆齣這兩箇幾丁質酶的編碼基因併在大腸桿菌中錶達,其原覈錶達產物均錶現幾丁質酶活性,其中chit1的原覈錶達產物能夠顯著抑製灰黴菌分生孢子的萌髮.對其原覈錶達條件進行優化,髮現在30℃下振盪培養24h,IPTG濃度為0.2～ 1.0 mmol/L時,其蛋白錶達量最高.
본연구통과평판투명권법사선획득일주구유궤정질매활성적생방세균CAB-1,해균주대번가회매병균등다충병원진균표현교강적길항활성.통과생리생화、16S rDNA화gyrB기인서렬측정,장균주CAB-1감정위위축아포간균(Bacillus atrophaeus).대균주CAB-1전기인조서렬진행분석화공능예측,발현해균주존재2개궤정질매편마기인chit1화chit2.통과PCR기술종균주CAB-1중극륭출저량개궤정질매적편마기인병재대장간균중표체,기원핵표체산물균표현궤정질매활성,기중chit1적원핵표체산물능구현저억제회매균분생포자적맹발.대기원핵표체조건진행우화,발현재30℃하진탕배양24h,IPTG농도위0.2～ 1.0 mmol/L시,기단백표체량최고.
