中山大学学报（自然科学版）
中山大學學報（自然科學版）
중산대학학보（자연과학판）
ACTA SCIENTIARUM NATURALIUM UNIVERSITATIS SUNYATSENI
2013年
2期
90-96
,共7页
李宁%孙君波%韦剑%丘力功%王艇%苏应娟
李寧%孫君波%韋劍%丘力功%王艇%囌應娟
리저%손군파%위검%구력공%왕정%소응연
CVNH%原核表达%条件优化
CVNH%原覈錶達%條件優化
CVNH%원핵표체%조건우화
CVNH(Cyanovirin-N homology)蛋白家族是具有抗HIV活性的蓝藻抗病毒蛋白-N(Cyanovirin-N,CVN)的同源物.在前期研究中,已首次获得水蕨Ceratopteris thalictroides CVNH基因的全长序列,构建了pET32a-CtCVNH的原核表达载体.以此为基础,对CVNH在大肠杆菌Rosetta 2(DE3)中的表达条件进行优化.分别探讨了最佳培养基类型及成分、培养基初始pH、诱导时机、诱导剂浓度及诱导时间.优化后的诱导条件是:含24 g·L-1酵母提取物和72 g·L-1胰蛋白胨的TB培养基、培养基初始pH为8.0、菌液A600nm为0.6时加入1.6g·L-1乳糖诱导6h.CVNH蛋白的表达量较优化前提高了1.9倍.这为进一步开展CVNH的药物研制和开发奠定基础.
CVNH(Cyanovirin-N homology)蛋白傢族是具有抗HIV活性的藍藻抗病毒蛋白-N(Cyanovirin-N,CVN)的同源物.在前期研究中,已首次穫得水蕨Ceratopteris thalictroides CVNH基因的全長序列,構建瞭pET32a-CtCVNH的原覈錶達載體.以此為基礎,對CVNH在大腸桿菌Rosetta 2(DE3)中的錶達條件進行優化.分彆探討瞭最佳培養基類型及成分、培養基初始pH、誘導時機、誘導劑濃度及誘導時間.優化後的誘導條件是:含24 g·L-1酵母提取物和72 g·L-1胰蛋白胨的TB培養基、培養基初始pH為8.0、菌液A600nm為0.6時加入1.6g·L-1乳糖誘導6h.CVNH蛋白的錶達量較優化前提高瞭1.9倍.這為進一步開展CVNH的藥物研製和開髮奠定基礎.
CVNH(Cyanovirin-N homology)단백가족시구유항HIV활성적람조항병독단백-N(Cyanovirin-N,CVN)적동원물.재전기연구중,이수차획득수궐Ceratopteris thalictroides CVNH기인적전장서렬,구건료pET32a-CtCVNH적원핵표체재체.이차위기출,대CVNH재대장간균Rosetta 2(DE3)중적표체조건진행우화.분별탐토료최가배양기류형급성분、배양기초시pH、유도시궤、유도제농도급유도시간.우화후적유도조건시:함24 g·L-1효모제취물화72 g·L-1이단백동적TB배양기、배양기초시pH위8.0、균액A600nm위0.6시가입1.6g·L-1유당유도6h.CVNH단백적표체량교우화전제고료1.9배.저위진일보개전CVNH적약물연제화개발전정기출.
