热带亚热带植物学报
熱帶亞熱帶植物學報
열대아열대식물학보
JOURNAL OF TROPICAL AND SUBTROPICAL BOTANY
2013年
2期
133-140
,共8页
番茄%SlmiR393%生长素受体同源基因%载体构建
番茄%SlmiR393%生長素受體同源基因%載體構建
번가%SlmiR393%생장소수체동원기인%재체구건
为研究番茄(Lycopersicum esculentum)的SlmiR393基因功能,采用生物信息学方法从番茄基因组数据库中获得SlmiR393的前体序列及其潜在的靶基因.以基因组DNA为模板,克隆了番茄SlmiR393前体基因并整合到pLP35S-100植物表达载体；采用5'RACE RT-PCR技术验证SlmiR393对预测靶基因mRNA的剪切作用,采用定量PCR技术检测SlmiR393及其靶标基因在番茄不同组织的表达.结果表明,SlmiR393的前体序列含有完整的茎环结构；成熟miR393与3个生长素受体同源基因(SlTIR1、SlTIR1-like1和SlAFB)之间具有识别作用位点.SlmiR393可对番茄3个靶基因的转录本进行剪切降解；SlmiR393与3个不同靶基因(SlTIR1、SlTIRl-like和SlAFB)的表达模式在叶和茎、花蕾、花中存在一定的互补关系.因此,推断番茄中的SlmiR393可能在特定的组织或发育时期介导特定的靶基因mRNA的剪切降解,初步证实生长素受体同源基因为SlmiR393的靶基因.此外,成功构建以CaMV35S为启动子的植物表达载体pLP35 S-pre-SlmiR393,为深入研究SlmiR393在番茄生长素信号转导中的功能奠定了基础.
為研究番茄(Lycopersicum esculentum)的SlmiR393基因功能,採用生物信息學方法從番茄基因組數據庫中穫得SlmiR393的前體序列及其潛在的靶基因.以基因組DNA為模闆,剋隆瞭番茄SlmiR393前體基因併整閤到pLP35S-100植物錶達載體；採用5'RACE RT-PCR技術驗證SlmiR393對預測靶基因mRNA的剪切作用,採用定量PCR技術檢測SlmiR393及其靶標基因在番茄不同組織的錶達.結果錶明,SlmiR393的前體序列含有完整的莖環結構；成熟miR393與3箇生長素受體同源基因(SlTIR1、SlTIR1-like1和SlAFB)之間具有識彆作用位點.SlmiR393可對番茄3箇靶基因的轉錄本進行剪切降解；SlmiR393與3箇不同靶基因(SlTIR1、SlTIRl-like和SlAFB)的錶達模式在葉和莖、花蕾、花中存在一定的互補關繫.因此,推斷番茄中的SlmiR393可能在特定的組織或髮育時期介導特定的靶基因mRNA的剪切降解,初步證實生長素受體同源基因為SlmiR393的靶基因.此外,成功構建以CaMV35S為啟動子的植物錶達載體pLP35 S-pre-SlmiR393,為深入研究SlmiR393在番茄生長素信號轉導中的功能奠定瞭基礎.
위연구번가(Lycopersicum esculentum)적SlmiR393기인공능,채용생물신식학방법종번가기인조수거고중획득SlmiR393적전체서렬급기잠재적파기인.이기인조DNA위모판,극륭료번가SlmiR393전체기인병정합도pLP35S-100식물표체재체；채용5'RACE RT-PCR기술험증SlmiR393대예측파기인mRNA적전절작용,채용정량PCR기술검측SlmiR393급기파표기인재번가불동조직적표체.결과표명,SlmiR393적전체서렬함유완정적경배결구；성숙miR393여3개생장소수체동원기인(SlTIR1、SlTIR1-like1화SlAFB)지간구유식별작용위점.SlmiR393가대번가3개파기인적전록본진행전절강해；SlmiR393여3개불동파기인(SlTIR1、SlTIRl-like화SlAFB)적표체모식재협화경、화뢰、화중존재일정적호보관계.인차,추단번가중적SlmiR393가능재특정적조직혹발육시기개도특정적파기인mRNA적전절강해,초보증실생장소수체동원기인위SlmiR393적파기인.차외,성공구건이CaMV35S위계동자적식물표체재체pLP35 S-pre-SlmiR393,위심입연구SlmiR393재번가생장소신호전도중적공능전정료기출.
