河南大学学报(医学版)
河南大學學報(醫學版)
하남대학학보(의학판)
JOURNAL OF HENAN UNIVERSITY (MEDICAL SCIENCE)
2009年
3期
190-193
,共4页
柴立辉%程相树%吴素霞%陈宗德%鄢文海%邢莹
柴立輝%程相樹%吳素霞%陳宗德%鄢文海%邢瑩
시립휘%정상수%오소하%진종덕%언문해%형형
人骨髓间充质干细胞%神经细胞%尼氏体%超微结构
人骨髓間充質榦細胞%神經細胞%尼氏體%超微結構
인골수간충질간세포%신경세포%니씨체%초미결구
目的:探讨人骨髓间充质干细胞(Bone Mesenchymal Stem Cells,BMSC)分化形成的神经样细胞的形态及结构特征.方法:采用密度梯度离心法和贴壁培养的方法分离纯化人BMSC,流式细胞仪检测CD34、CD45、CD44等细胞表面抗原在BMSC上的表达.联合应用碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)、表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)、二甲基亚枫(dimethyl sulphoxide,DMSO)和丁羟基茴香醚(butyl hydroxy anisol,BHA)诱导人BMSC向神经细胞分化.光学显微镜下观察细胞的形态变化;甲苯胺蓝染色法对分化后细胞进行尼氏体染色;透射电子显微镜观察分化后细胞的超徽结构特点.结果:分离纯化的人BMSC经流式细胞仪检测显示间充质干细胞相对特异性抗原CD44表达阳性,造血干细胞特异性抗原CD34、CD45表达阴性;加入诱导培养基培养2周后,细胞胞体变圆,折光性增强,有突起形成;甲苯胺蓝染色法显示分化后的细胞尼氏体染色阳性;透射电镜下细胞胞浆中有大量密集的呈扁平囊状的粗面内质网及其间的一些游离核糖体和多聚核糖体所组成的尼氏体的超微结构,并有神经微丝的形成.结论:EGF/bFGF/DMSO/BHA诱导人BMSC分化形成的神经样细胞能够表达成熟神经细胞典型的形态及超徽结构特征.
目的:探討人骨髓間充質榦細胞(Bone Mesenchymal Stem Cells,BMSC)分化形成的神經樣細胞的形態及結構特徵.方法:採用密度梯度離心法和貼壁培養的方法分離純化人BMSC,流式細胞儀檢測CD34、CD45、CD44等細胞錶麵抗原在BMSC上的錶達.聯閤應用堿性成纖維細胞生長因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)、錶皮生長因子(epidermal growth factor,EGF)、二甲基亞楓(dimethyl sulphoxide,DMSO)和丁羥基茴香醚(butyl hydroxy anisol,BHA)誘導人BMSC嚮神經細胞分化.光學顯微鏡下觀察細胞的形態變化;甲苯胺藍染色法對分化後細胞進行尼氏體染色;透射電子顯微鏡觀察分化後細胞的超徽結構特點.結果:分離純化的人BMSC經流式細胞儀檢測顯示間充質榦細胞相對特異性抗原CD44錶達暘性,造血榦細胞特異性抗原CD34、CD45錶達陰性;加入誘導培養基培養2週後,細胞胞體變圓,摺光性增彊,有突起形成;甲苯胺藍染色法顯示分化後的細胞尼氏體染色暘性;透射電鏡下細胞胞漿中有大量密集的呈扁平囊狀的粗麵內質網及其間的一些遊離覈糖體和多聚覈糖體所組成的尼氏體的超微結構,併有神經微絲的形成.結論:EGF/bFGF/DMSO/BHA誘導人BMSC分化形成的神經樣細胞能夠錶達成熟神經細胞典型的形態及超徽結構特徵.
목적:탐토인골수간충질간세포(Bone Mesenchymal Stem Cells,BMSC)분화형성적신경양세포적형태급결구특정.방법:채용밀도제도리심법화첩벽배양적방법분리순화인BMSC,류식세포의검측CD34、CD45、CD44등세포표면항원재BMSC상적표체.연합응용감성성섬유세포생장인자(basic fibroblast growth factor,bFGF)、표피생장인자(epidermal growth factor,EGF)、이갑기아풍(dimethyl sulphoxide,DMSO)화정간기회향미(butyl hydroxy anisol,BHA)유도인BMSC향신경세포분화.광학현미경하관찰세포적형태변화;갑분알람염색법대분화후세포진행니씨체염색;투사전자현미경관찰분화후세포적초휘결구특점.결과:분리순화적인BMSC경류식세포의검측현시간충질간세포상대특이성항원CD44표체양성,조혈간세포특이성항원CD34、CD45표체음성;가입유도배양기배양2주후,세포포체변원,절광성증강,유돌기형성;갑분알람염색법현시분화후적세포니씨체염색양성;투사전경하세포포장중유대량밀집적정편평낭상적조면내질망급기간적일사유리핵당체화다취핵당체소조성적니씨체적초미결구,병유신경미사적형성.결론:EGF/bFGF/DMSO/BHA유도인BMSC분화형성적신경양세포능구표체성숙신경세포전형적형태급초휘결구특정.