重庆师范大学学报（自然科学版）
重慶師範大學學報（自然科學版）
중경사범대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF CHONGQING NORMAL UNIVERSITY（NATURAL SCIENCE EDITION）
2009年
4期
38-42
,共5页
宋锡迅%余晓东%林奕心%和七一%李恒
宋錫迅%餘曉東%林奕心%和七一%李恆
송석신%여효동%림혁심%화칠일%리항
白唇竹叶青%蛇毒类凝血酶(SVTLEs)%克隆%序列分析
白脣竹葉青%蛇毒類凝血酶(SVTLEs)%剋隆%序列分析
백진죽협청%사독류응혈매(SVTLEs)%극륭%서렬분석
通过分析多种已知的毒蛇蛇毒类凝血酶(SVTLEs)基因序列同源性,以保守的N和C末端氨基酸序列设计引物,克隆得到白唇竹叶青(Trimeresurus albolabris)SVTLE基因并分析其序列.以毒腺总RNA为模板进行RT-PCR,纯化并克隆至pMD18-T.结果表明,该酶基因大小为777 bp;推测出其相应氨基酸序列含258个氨基酸残基,分子量为28.02 kD, pI值为6.07;其3 个可能糖基化位点为NDT103～105、NNS121～123和NRT251～253;与其它毒蛇的已知SVTLEs基因比较分析,推测出其含6对二硫键即Cys31-162、Cys50-66、Cys98-256、Cys142-210、Cys174-189和Cys200-225;其催化活性中心氨基酸残基为His65、Asp110和Ser204.分子进化树分析表明,毒蛇SVTLEs一级结构的进化具有一定种属特征,可为蛇的系统分类提供参考.
通過分析多種已知的毒蛇蛇毒類凝血酶(SVTLEs)基因序列同源性,以保守的N和C末耑氨基痠序列設計引物,剋隆得到白脣竹葉青(Trimeresurus albolabris)SVTLE基因併分析其序列.以毒腺總RNA為模闆進行RT-PCR,純化併剋隆至pMD18-T.結果錶明,該酶基因大小為777 bp;推測齣其相應氨基痠序列含258箇氨基痠殘基,分子量為28.02 kD, pI值為6.07;其3 箇可能糖基化位點為NDT103～105、NNS121～123和NRT251～253;與其它毒蛇的已知SVTLEs基因比較分析,推測齣其含6對二硫鍵即Cys31-162、Cys50-66、Cys98-256、Cys142-210、Cys174-189和Cys200-225;其催化活性中心氨基痠殘基為His65、Asp110和Ser204.分子進化樹分析錶明,毒蛇SVTLEs一級結構的進化具有一定種屬特徵,可為蛇的繫統分類提供參攷.
통과분석다충이지적독사사독류응혈매(SVTLEs)기인서렬동원성,이보수적N화C말단안기산서렬설계인물,극륭득도백진죽협청(Trimeresurus albolabris)SVTLE기인병분석기서렬.이독선총RNA위모판진행RT-PCR,순화병극륭지pMD18-T.결과표명,해매기인대소위777 bp;추측출기상응안기산서렬함258개안기산잔기,분자량위28.02 kD, pI치위6.07;기3 개가능당기화위점위NDT103～105、NNS121～123화NRT251～253;여기타독사적이지SVTLEs기인비교분석,추측출기함6대이류건즉Cys31-162、Cys50-66、Cys98-256、Cys142-210、Cys174-189화Cys200-225;기최화활성중심안기산잔기위His65、Asp110화Ser204.분자진화수분석표명,독사SVTLEs일급결구적진화구유일정충속특정,가위사적계통분류제공삼고.
