重庆医科大学学报
重慶醫科大學學報
중경의과대학학보
UNIVERSITATIS SCIENTIAE MEDICINAE CHONGQING
2009年
9期
1157-1161
,共5页
杨超%吴小候%罗春丽%蔡晓钟%吴绮思
楊超%吳小候%囉春麗%蔡曉鐘%吳綺思
양초%오소후%라춘려%채효종%오기사
膀胱癌%hepaCAM基因%T24细胞%转染%抑癌基因
膀胱癌%hepaCAM基因%T24細胞%轉染%抑癌基因
방광암%hepaCAM기인%T24세포%전염%억암기인
目的:研究hepaCAM基因对人膀胱癌T24细胞增殖的影响.方法:运用脂质体转染方法,将pEGFP-N2-hepaCAM质粒转入T24细胞株,经G418筛选获得稳定表达的细胞株;RT-PCR及Western blot方法检测目的基因和蛋白表达;MTT法及克隆形成实验研究hepaCAM基因对T24细胞体外生长的作用;流式细胞仪检测细胞周期分布;RT-PCR技术测定周期调控蛋白CyclinD1的mRNA表达变化.结果:RT-PCR和Western blot方法分别检测到hepaCAM的基因表达和蛋白表达,MTT检测转染hepaCAM基因的细胞生长速度较对照组和空载体组明显减慢(P<0.01),克隆形成率明显小于对照组和空载体组(P<0.01).细胞周期中G0/G1期比例明显增高(P<0.05),而S期比例减少;CyclinD1 mRNA表达明显下调(P<0.05).结论:HepaCAM基因通过阻滞细胞于G0/G1期,减少CyclinD1 mRNA表达,抑制T24细胞的增殖.
目的:研究hepaCAM基因對人膀胱癌T24細胞增殖的影響.方法:運用脂質體轉染方法,將pEGFP-N2-hepaCAM質粒轉入T24細胞株,經G418篩選穫得穩定錶達的細胞株;RT-PCR及Western blot方法檢測目的基因和蛋白錶達;MTT法及剋隆形成實驗研究hepaCAM基因對T24細胞體外生長的作用;流式細胞儀檢測細胞週期分佈;RT-PCR技術測定週期調控蛋白CyclinD1的mRNA錶達變化.結果:RT-PCR和Western blot方法分彆檢測到hepaCAM的基因錶達和蛋白錶達,MTT檢測轉染hepaCAM基因的細胞生長速度較對照組和空載體組明顯減慢(P<0.01),剋隆形成率明顯小于對照組和空載體組(P<0.01).細胞週期中G0/G1期比例明顯增高(P<0.05),而S期比例減少;CyclinD1 mRNA錶達明顯下調(P<0.05).結論:HepaCAM基因通過阻滯細胞于G0/G1期,減少CyclinD1 mRNA錶達,抑製T24細胞的增殖.
목적:연구hepaCAM기인대인방광암T24세포증식적영향.방법:운용지질체전염방법,장pEGFP-N2-hepaCAM질립전입T24세포주,경G418사선획득은정표체적세포주;RT-PCR급Western blot방법검측목적기인화단백표체;MTT법급극륭형성실험연구hepaCAM기인대T24세포체외생장적작용;류식세포의검측세포주기분포;RT-PCR기술측정주기조공단백CyclinD1적mRNA표체변화.결과:RT-PCR화Western blot방법분별검측도hepaCAM적기인표체화단백표체,MTT검측전염hepaCAM기인적세포생장속도교대조조화공재체조명현감만(P<0.01),극륭형성솔명현소우대조조화공재체조(P<0.01).세포주기중G0/G1기비례명현증고(P<0.05),이S기비례감소;CyclinD1 mRNA표체명현하조(P<0.05).결론:HepaCAM기인통과조체세포우G0/G1기,감소CyclinD1 mRNA표체,억제T24세포적증식.
