CAJ | 학술논문

目的:建立一种可用于体外研究椎间盘退变的椎间盘器官培养模型,探讨渗透压负荷对模型椎间盘细胞活力和代谢的影响.方法:4～6月龄新西兰大白兔10只,均分为两组,处死后立即手术切取胸腰段椎间盘,每只9个,分别在等渗(300mOsm/kg,等渗组)或高渗(410mOsm/kg,高渗组)培养基中进行整体器官培养,在培养前和培养后第7、14、21、28天,利用Mitotracker Green荧光探针、组织化学和生物化学方法评估两组椎间盘髓核细胞的活力、结构的完整性以及蛋白多糖含量的变化.结果:取材后培养前椎间盘髓核细胞的荧光强度为11503±402,在体外培养过程中,高渗组第14天荧光强度为9202±907,与培养前比较差异有显著性意义(P＜0.05),第7、21和28天分别为10504±710、10860±711、10713±953,与培养前相比较无显著性差异(P＞0.05);等渗组第7、14、21、28天分别为11350±351、11207±385、10914±300、10862±229,与培养前比较无显著性差异(P＞0.05);两组在第7、21和28天时无显著性意义(P＞0.05).在培养过程中,两组椎间盘髓核和纤维环的组织结构能够基本保持完整,髓核蛋白多糖含量在培养第7天高渗组和等渗组分别为3.33±0.28m/100mg和2.83±0.25m/100mg,均较培养前(5.03±0.37m/100mg)明显降低(P＜0.01),第14、21、28天时与第7天相比下降不明显(P＞0.05).两组相同时间点的差异无显著性意义(P＞0.05).结论:椎间盘器官培养模型可以在等渗或高渗环境中有效维持兔椎间盘结构的完整性和髓核细胞的活力至少4周.
목적:건립일충가용우체외연구추간반퇴변적추간반기관배양모형,탐토삼투압부하대모형추간반세포활력화대사적영향.방법:4～6월령신서란대백토10지,균분위량조,처사후립즉수술절취흉요단추간반,매지9개,분별재등삼(300mOsm/kg,등삼조)혹고삼(410mOsm/kg,고삼조)배양기중진행정체기관배양,재배양전화배양후제7、14、21、28천,이용Mitotracker Green형광탐침、조직화학화생물화학방법평고량조추간반수핵세포적활력、결구적완정성이급단백다당함량적변화.결과:취재후배양전추간반수핵세포적형광강도위11503±402,재체외배양과정중,고삼조제14천형광강도위9202±907,여배양전비교차이유현저성의의(P＜0.05),제7、21화28천분별위10504±710、10860±711、10713±953,여배양전상비교무현저성차이(P＞0.05);등삼조제7、14、21、28천분별위11350±351、11207±385、10914±300、10862±229,여배양전비교무현저성차이(P＞0.05);량조재제7、21화28천시무현저성의의(P＞0.05).재배양과정중,량조추간반수핵화섬유배적조직결구능구기본보지완정,수핵단백다당함량재배양제7천고삼조화등삼조분별위3.33±0.28m/100mg화2.83±0.25m/100mg,균교배양전(5.03±0.37m/100mg)명현강저(P＜0.01),제14、21、28천시여제7천상비하강불명현(P＞0.05).량조상동시간점적차이무현저성의의(P＞0.05).결론:추간반기관배양모형가이재등삼혹고삼배경중유효유지토추간반결구적완정성화수핵세포적활력지소4주.