中华神经医学杂志
中華神經醫學雜誌
중화신경의학잡지
CHINESE JOURNAL OF NEUROMEDICINE
2008年
2期
109-114
,共6页
李骥腾%黄强%陈骅%王爱东%董军%兰青
李驥騰%黃彊%陳驊%王愛東%董軍%蘭青
리기등%황강%진화%왕애동%동군%란청
神经胶质瘤%CDC2%RNA干扰%基因治疗
神經膠質瘤%CDC2%RNA榦擾%基因治療
신경효질류%CDC2%RNA간우%기인치료
目的 探讨抑制细胞周期依赖性激酶CDC2基因对人脑胶质瘤细胞生长的影响,并为其作为胶质瘤发生发展相关基因在胶质瘤治疗方面的应用价值提供实验依据.方法 利用本实验室基因重组构建的CDC2 shRNA逆转录病毒表达质粒对体外培养的人脑胶质瘤细胞进行转染.倒置显微镜观察细胞形态和数量变化;RT-PCR及荧光实时定量PCR检测CDC2 mRNA表达;Western blot检测CDC2蛋白表达;流式细胞仪检测细胞周期和凋亡的变化;透射电子显微镜观察细胞超微结构.结果 人脑胶质瘤细胞系U251在转染针对CDC2的shRNA逆转录病毒表达质粒48h后,贴壁生长的细胞逐渐漂浮,细胞生长受到抑制,CDC2 mRNA下调均达98%以上,蛋白表达下调达92%以上,同时出现了明显的细胞G2/M期阻滞,细胞凋亡由0.57%上升到13.01%,并且超微结构受损明显.结论 CDC2 shRNA逆转录病毒表达质粒介导的RNA干扰能有效的抑制U251细胞的增殖,CDC2可作为胶质瘤基因治疗靶分子作进一步研究.
目的 探討抑製細胞週期依賴性激酶CDC2基因對人腦膠質瘤細胞生長的影響,併為其作為膠質瘤髮生髮展相關基因在膠質瘤治療方麵的應用價值提供實驗依據.方法 利用本實驗室基因重組構建的CDC2 shRNA逆轉錄病毒錶達質粒對體外培養的人腦膠質瘤細胞進行轉染.倒置顯微鏡觀察細胞形態和數量變化;RT-PCR及熒光實時定量PCR檢測CDC2 mRNA錶達;Western blot檢測CDC2蛋白錶達;流式細胞儀檢測細胞週期和凋亡的變化;透射電子顯微鏡觀察細胞超微結構.結果 人腦膠質瘤細胞繫U251在轉染針對CDC2的shRNA逆轉錄病毒錶達質粒48h後,貼壁生長的細胞逐漸漂浮,細胞生長受到抑製,CDC2 mRNA下調均達98%以上,蛋白錶達下調達92%以上,同時齣現瞭明顯的細胞G2/M期阻滯,細胞凋亡由0.57%上升到13.01%,併且超微結構受損明顯.結論 CDC2 shRNA逆轉錄病毒錶達質粒介導的RNA榦擾能有效的抑製U251細胞的增殖,CDC2可作為膠質瘤基因治療靶分子作進一步研究.
목적 탐토억제세포주기의뢰성격매CDC2기인대인뇌효질류세포생장적영향,병위기작위효질류발생발전상관기인재효질류치료방면적응용개치제공실험의거.방법 이용본실험실기인중조구건적CDC2 shRNA역전록병독표체질립대체외배양적인뇌효질류세포진행전염.도치현미경관찰세포형태화수량변화;RT-PCR급형광실시정량PCR검측CDC2 mRNA표체;Western blot검측CDC2단백표체;류식세포의검측세포주기화조망적변화;투사전자현미경관찰세포초미결구.결과 인뇌효질류세포계U251재전염침대CDC2적shRNA역전록병독표체질립48h후,첩벽생장적세포축점표부,세포생장수도억제,CDC2 mRNA하조균체98%이상,단백표체하조체92%이상,동시출현료명현적세포G2/M기조체,세포조망유0.57%상승도13.01%,병차초미결구수손명현.결론 CDC2 shRNA역전록병독표체질립개도적RNA간우능유효적억제U251세포적증식,CDC2가작위효질류기인치료파분자작진일보연구.
