重庆医学
重慶醫學
중경의학
CHONGQING MEDICAL JOURNAL
2012年
33期
3504-3505,3508
,共3页
核因子-κB%RNA干扰%质粒
覈因子-κB%RNA榦擾%質粒
핵인자-κB%RNA간우%질립
目的 构建转录因子NF-κB的RNA干扰(RNAi)质粒,为研究NF-κB参与的细胞信号通路及以其为靶点的基因治疗提供稳定转染的RNAi质粒.方法 设计针对NF-κB的shRNA特异性序列,应用基因重组技术克隆到pSilencer 1.0-U6表达载体,EcoRⅠ和ApaⅠ双酶切及DNA测序鉴定重组克隆;脂质体转染RNAi重组载体至前列腺癌细胞PC-3后,Western blot分析各组NF-κB蛋白表达水平.结果 双酶切和DNA测序证实shRNA正确插入pSilencer 1.0-U6质粒; Western blot结果显示与空质粒对照组比较NF-κB转染组细胞NF-κB表达明显下调.结论 成功构建人NF-κB基因RNAi质粒,为研究NF-κB参与的细胞信号通路提供了稳定转染细胞的干扰质粒,为靶向NF-κB的基因治疗提供了有力工具.
目的 構建轉錄因子NF-κB的RNA榦擾(RNAi)質粒,為研究NF-κB參與的細胞信號通路及以其為靶點的基因治療提供穩定轉染的RNAi質粒.方法 設計針對NF-κB的shRNA特異性序列,應用基因重組技術剋隆到pSilencer 1.0-U6錶達載體,EcoRⅠ和ApaⅠ雙酶切及DNA測序鑒定重組剋隆;脂質體轉染RNAi重組載體至前列腺癌細胞PC-3後,Western blot分析各組NF-κB蛋白錶達水平.結果 雙酶切和DNA測序證實shRNA正確插入pSilencer 1.0-U6質粒; Western blot結果顯示與空質粒對照組比較NF-κB轉染組細胞NF-κB錶達明顯下調.結論 成功構建人NF-κB基因RNAi質粒,為研究NF-κB參與的細胞信號通路提供瞭穩定轉染細胞的榦擾質粒,為靶嚮NF-κB的基因治療提供瞭有力工具.
목적 구건전록인자NF-κB적RNA간우(RNAi)질립,위연구NF-κB삼여적세포신호통로급이기위파점적기인치료제공은정전염적RNAi질립.방법 설계침대NF-κB적shRNA특이성서렬,응용기인중조기술극륭도pSilencer 1.0-U6표체재체,EcoRⅠ화ApaⅠ쌍매절급DNA측서감정중조극륭;지질체전염RNAi중조재체지전렬선암세포PC-3후,Western blot분석각조NF-κB단백표체수평.결과 쌍매절화DNA측서증실shRNA정학삽입pSilencer 1.0-U6질립; Western blot결과현시여공질립대조조비교NF-κB전염조세포NF-κB표체명현하조.결론 성공구건인NF-κB기인RNAi질립,위연구NF-κB삼여적세포신호통로제공료은정전염세포적간우질립,위파향NF-κB적기인치료제공료유력공구.
