重庆医学
重慶醫學
중경의학
CHONGQING MEDICAL JOURNAL
2012年
33期
3465-3467,3470,封2
,共5页
王川%亢渝俊%姜政%王丕龙
王川%亢渝俊%薑政%王丕龍
왕천%항투준%강정%왕비룡
水甘油通道蛋白质类%非酒精性脂肪肝病%重组质粒%基因治疗
水甘油通道蛋白質類%非酒精性脂肪肝病%重組質粒%基因治療
수감유통도단백질류%비주정성지방간병%중조질립%기인치료
目的 将人水甘油通道蛋白9(AQP9)真核表达质粒pEGFP-N1-AQP9及干扰质粒pshRNA-AQP9通过电穿孔转化减毒沙门菌株SL7207,并验证其表达情况,为阐明AQP9在非酒精性脂肪肝病(NAFLD)中的作用奠定基础.方法 从人肝脏组织中通过RT-PCR获得AQP9基因,克隆到载体pEGFP-N1上,构建真核表达质粒pEGFP-N1-AQP9,设计合成针对人AQP9的siRNA,退火形成双链shRNA,并插入pGenesil-1质粒中,构建干扰质粒pshRNA-AQP9,电穿孔转化减毒沙门菌株SL7207,通过PCR、Western blot验证其表达情况,并检测其稳定性.结果 成功构建pEGFP-N1-AQP9及pshRNA-AQP9重组质粒,将其转化SL7207后,能在重组沙门菌中表达.结论 成功构建SL7207/pEGFP-N1-AQP9及SL7207/pshRNA-AQP9重组沙门菌,为进一步研究AQP9对NAFLD的基因治疗奠定基础.
目的 將人水甘油通道蛋白9(AQP9)真覈錶達質粒pEGFP-N1-AQP9及榦擾質粒pshRNA-AQP9通過電穿孔轉化減毒沙門菌株SL7207,併驗證其錶達情況,為闡明AQP9在非酒精性脂肪肝病(NAFLD)中的作用奠定基礎.方法 從人肝髒組織中通過RT-PCR穫得AQP9基因,剋隆到載體pEGFP-N1上,構建真覈錶達質粒pEGFP-N1-AQP9,設計閤成針對人AQP9的siRNA,退火形成雙鏈shRNA,併插入pGenesil-1質粒中,構建榦擾質粒pshRNA-AQP9,電穿孔轉化減毒沙門菌株SL7207,通過PCR、Western blot驗證其錶達情況,併檢測其穩定性.結果 成功構建pEGFP-N1-AQP9及pshRNA-AQP9重組質粒,將其轉化SL7207後,能在重組沙門菌中錶達.結論 成功構建SL7207/pEGFP-N1-AQP9及SL7207/pshRNA-AQP9重組沙門菌,為進一步研究AQP9對NAFLD的基因治療奠定基礎.
목적 장인수감유통도단백9(AQP9)진핵표체질립pEGFP-N1-AQP9급간우질립pshRNA-AQP9통과전천공전화감독사문균주SL7207,병험증기표체정황,위천명AQP9재비주정성지방간병(NAFLD)중적작용전정기출.방법 종인간장조직중통과RT-PCR획득AQP9기인,극륭도재체pEGFP-N1상,구건진핵표체질립pEGFP-N1-AQP9,설계합성침대인AQP9적siRNA,퇴화형성쌍련shRNA,병삽입pGenesil-1질립중,구건간우질립pshRNA-AQP9,전천공전화감독사문균주SL7207,통과PCR、Western blot험증기표체정황,병검측기은정성.결과 성공구건pEGFP-N1-AQP9급pshRNA-AQP9중조질립,장기전화SL7207후,능재중조사문균중표체.결론 성공구건SL7207/pEGFP-N1-AQP9급SL7207/pshRNA-AQP9중조사문균,위진일보연구AQP9대NAFLD적기인치료전정기출.
