中国药理学通报
中國藥理學通報
중국약이학통보
CHINESE PHARMACOLOGICAL BULLETIN
2013年
9期
1269-1274
,共6页
杨帆%孙秋艳%刘亮亮%蒋江涛%赵虹%王文娟%王鹏龙%张波%郑秋生
楊帆%孫鞦豔%劉亮亮%蔣江濤%趙虹%王文娟%王鵬龍%張波%鄭鞦生
양범%손추염%류량량%장강도%조홍%왕문연%왕붕룡%장파%정추생
B16F0%维康醇%凋亡%Bax/Bcl-2%Caspase-9%Caspase-3%线粒体
B16F0%維康醇%凋亡%Bax/Bcl-2%Caspase-9%Caspase-3%線粒體
B16F0%유강순%조망%Bax/Bcl-2%Caspase-9%Caspase-3%선립체
目的 本研究探讨维康醇诱导小鼠黑色素瘤B16F0细胞凋亡的机制.方法 噻唑蓝(MTT)法检测维康醇对小鼠B16F0细胞增殖的影响;台盼蓝拒染法检测细胞致死率;吖啶橙/溴乙啶(AO/EB)荧光染色法观察细胞凋亡形态;Hoechst 33258染色观察药物处理后细胞形态的变化;流式细胞仪Annexin V-FITC/PI检测细胞凋亡率;Caspase-9/3试剂盒检测半胱氨酸蛋白酶-9(Caspase-9)和半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)的活性;实时荧光定量(Real-Time PCR)法检测Bax、Bcl-2基因表达水平.结果 维康醇能抑制B16F0细胞的恶性增殖,并呈剂量依赖性(P<0.05或P<0.01);细胞致死率也不断上升(P<0.05或P<0.01);在荧光显微镜下发现维康醇作用于B16F0细胞后出现明显的凋亡形态;随着维康醇浓度的增加,细胞凋亡率呈剂量依赖性增长(P<0.05或P<0.01);Caspase-3、Caspase-9 活性逐渐升高(P<0.05或P<0.01);Bax/Bcl-2表达的比率上调(P<0.01).结论 维康醇能够通过抑制B16F0细胞的恶性增殖,最终诱导细胞的凋亡.其机制是通过上调Bax/Bcl-2表达的比率,活化Caspase-9并进一步激活Caspase-3诱导B16F0细胞凋亡.推测维康醇诱导B16F0细胞凋亡是通过线粒体调控的内源通路介导的.
目的 本研究探討維康醇誘導小鼠黑色素瘤B16F0細胞凋亡的機製.方法 噻唑藍(MTT)法檢測維康醇對小鼠B16F0細胞增殖的影響;檯盼藍拒染法檢測細胞緻死率;吖啶橙/溴乙啶(AO/EB)熒光染色法觀察細胞凋亡形態;Hoechst 33258染色觀察藥物處理後細胞形態的變化;流式細胞儀Annexin V-FITC/PI檢測細胞凋亡率;Caspase-9/3試劑盒檢測半胱氨痠蛋白酶-9(Caspase-9)和半胱氨痠蛋白酶-3(Caspase-3)的活性;實時熒光定量(Real-Time PCR)法檢測Bax、Bcl-2基因錶達水平.結果 維康醇能抑製B16F0細胞的噁性增殖,併呈劑量依賴性(P<0.05或P<0.01);細胞緻死率也不斷上升(P<0.05或P<0.01);在熒光顯微鏡下髮現維康醇作用于B16F0細胞後齣現明顯的凋亡形態;隨著維康醇濃度的增加,細胞凋亡率呈劑量依賴性增長(P<0.05或P<0.01);Caspase-3、Caspase-9 活性逐漸升高(P<0.05或P<0.01);Bax/Bcl-2錶達的比率上調(P<0.01).結論 維康醇能夠通過抑製B16F0細胞的噁性增殖,最終誘導細胞的凋亡.其機製是通過上調Bax/Bcl-2錶達的比率,活化Caspase-9併進一步激活Caspase-3誘導B16F0細胞凋亡.推測維康醇誘導B16F0細胞凋亡是通過線粒體調控的內源通路介導的.
목적 본연구탐토유강순유도소서흑색소류B16F0세포조망적궤제.방법 새서람(MTT)법검측유강순대소서B16F0세포증식적영향;태반람거염법검측세포치사솔;아정등/추을정(AO/EB)형광염색법관찰세포조망형태;Hoechst 33258염색관찰약물처리후세포형태적변화;류식세포의Annexin V-FITC/PI검측세포조망솔;Caspase-9/3시제합검측반광안산단백매-9(Caspase-9)화반광안산단백매-3(Caspase-3)적활성;실시형광정량(Real-Time PCR)법검측Bax、Bcl-2기인표체수평.결과 유강순능억제B16F0세포적악성증식,병정제량의뢰성(P<0.05혹P<0.01);세포치사솔야불단상승(P<0.05혹P<0.01);재형광현미경하발현유강순작용우B16F0세포후출현명현적조망형태;수착유강순농도적증가,세포조망솔정제량의뢰성증장(P<0.05혹P<0.01);Caspase-3、Caspase-9 활성축점승고(P<0.05혹P<0.01);Bax/Bcl-2표체적비솔상조(P<0.01).결론 유강순능구통과억제B16F0세포적악성증식,최종유도세포적조망.기궤제시통과상조Bax/Bcl-2표체적비솔,활화Caspase-9병진일보격활Caspase-3유도B16F0세포조망.추측유강순유도B16F0세포조망시통과선립체조공적내원통로개도적.
