中国医药生物技术
中國醫藥生物技術
중국의약생물기술
CHINESE MEDICINAL BIOTECHNOLOGY
2009年
6期
445-448
,共4页
张建佚%冯洁%杨泽%霍正浩
張建佚%馮潔%楊澤%霍正浩
장건일%풍길%양택%곽정호
突变%多态性%单核苷酸%线粒体%高分辨率熔解曲线
突變%多態性%單覈苷痠%線粒體%高分辨率鎔解麯線
돌변%다태성%단핵감산%선립체%고분변솔용해곡선
Mutation%Single nucleotide%polymorphism%Mitochondrial%High resolution melting
目的 探讨高分辨率熔解曲线(high rgsolution meltjng,HRM)技术在线粒体13928G>C突变分析中应用的可行性.方法 在PCR前,体系中加入饱和染料、高温寡核苷酸内参(96℃)、低温寡核苷酸内参(60℃)和与待测样本等体积的已知基因型为GG的模板进行混样扩增,运用HRM技术对定量DNA的PCR产物进行基因分型,并从中随机抽取20例进行测序验证.结果 930例样本中野生型GG占728例,突变型CC占202例;DNA定量有助于HRM分析时对分型结果的判断;同时联合运用高、低温内参比只用一种内参分型效果好;随机抽取的20例样本的测序结果与HRM分型结果相一致.结论 运用高分辨率熔解曲线小扩增子法结合混样法可对线粒体基因组13928G>C突变进行准确分型.
目的 探討高分辨率鎔解麯線(high rgsolution meltjng,HRM)技術在線粒體13928G>C突變分析中應用的可行性.方法 在PCR前,體繫中加入飽和染料、高溫寡覈苷痠內參(96℃)、低溫寡覈苷痠內參(60℃)和與待測樣本等體積的已知基因型為GG的模闆進行混樣擴增,運用HRM技術對定量DNA的PCR產物進行基因分型,併從中隨機抽取20例進行測序驗證.結果 930例樣本中野生型GG佔728例,突變型CC佔202例;DNA定量有助于HRM分析時對分型結果的判斷;同時聯閤運用高、低溫內參比隻用一種內參分型效果好;隨機抽取的20例樣本的測序結果與HRM分型結果相一緻.結論 運用高分辨率鎔解麯線小擴增子法結閤混樣法可對線粒體基因組13928G>C突變進行準確分型.
목적 탐토고분변솔용해곡선(high rgsolution meltjng,HRM)기술재선립체13928G>C돌변분석중응용적가행성.방법 재PCR전,체계중가입포화염료、고온과핵감산내삼(96℃)、저온과핵감산내삼(60℃)화여대측양본등체적적이지기인형위GG적모판진행혼양확증,운용HRM기술대정량DNA적PCR산물진행기인분형,병종중수궤추취20례진행측서험증.결과 930례양본중야생형GG점728례,돌변형CC점202례;DNA정량유조우HRM분석시대분형결과적판단;동시연합운용고、저온내삼비지용일충내삼분형효과호;수궤추취적20례양본적측서결과여HRM분형결과상일치.결론 운용고분변솔용해곡선소확증자법결합혼양법가대선립체기인조13928G>C돌변진행준학분형.
