生物学杂志
生物學雜誌
생물학잡지
JOURNAL OF BIOLOGY
2009年
6期
56-58
,共3页
于智勇%王俊%史东艳%韩野%郭联合%薛庆於%沈维干
于智勇%王俊%史東豔%韓野%郭聯閤%薛慶於%瀋維榦
우지용%왕준%사동염%한야%곽연합%설경어%침유간
MOB2%真核表达%稳定细胞系
MOB2%真覈錶達%穩定細胞繫
MOB2%진핵표체%은정세포계
MOB2%eukaryotic expression%stable cell line
通过RT-PCR从培养的HUVECs中扩增MOB2基因片段,将该片段克隆在真核表达载体pEGFP-Cl中,转染NIH3T3细胞,经G418筛选,构建稳定表达细胞系,并用荧光显微镜和Western blot对其进行鉴定.经RT-PCR扩增出734 bp基因片段,经测序分析并与GenBank的DNA序列比对分析后,在NIH3T3细胞中表达.G418筛选后,细胞荧光信号较强,Western blot检测.细胞中的融合蛋白能够与抗MOB2的多抗结合.成功地扩增了HUVECs中的MOB2基因全长cDNA并进行真核表达与鉴定.
通過RT-PCR從培養的HUVECs中擴增MOB2基因片段,將該片段剋隆在真覈錶達載體pEGFP-Cl中,轉染NIH3T3細胞,經G418篩選,構建穩定錶達細胞繫,併用熒光顯微鏡和Western blot對其進行鑒定.經RT-PCR擴增齣734 bp基因片段,經測序分析併與GenBank的DNA序列比對分析後,在NIH3T3細胞中錶達.G418篩選後,細胞熒光信號較彊,Western blot檢測.細胞中的融閤蛋白能夠與抗MOB2的多抗結閤.成功地擴增瞭HUVECs中的MOB2基因全長cDNA併進行真覈錶達與鑒定.
통과RT-PCR종배양적HUVECs중확증MOB2기인편단,장해편단극륭재진핵표체재체pEGFP-Cl중,전염NIH3T3세포,경G418사선,구건은정표체세포계,병용형광현미경화Western blot대기진행감정.경RT-PCR확증출734 bp기인편단,경측서분석병여GenBank적DNA서렬비대분석후,재NIH3T3세포중표체.G418사선후,세포형광신호교강,Western blot검측.세포중적융합단백능구여항MOB2적다항결합.성공지확증료HUVECs중적MOB2기인전장cDNA병진행진핵표체여감정.
