CAJ | 학술논문

为了评价基因修饰对提高DNA疫苗免疫效果的影响,将NDV F48E9株HN基因进行密码子优化和信号肽替换,修饰后的基因命名为SoptiHN,将HN和SoptiHN基因分别克隆至pVAX 1和含CpG-ODN刺激序列的载体pVAX 1-CpG中,共获得pV-SoptiHN、pVC-SoptiHN、pV-HN和pVC-HN 4种质粒.将4种质粒股四头肌多点注射3周龄SPF鸡,每只鸡200 μg,以PBS为非免疫对照;一免后3周以相同的剂量加强免疫,二免后2周以103EID50NDV的F48E9强毒株进行攻毒,计算发病率、死亡率以及排毒情况.试验期间每周采集血清进行HI抗体的检测,同时采集抗凝血分离外周血淋巴细胞,分析免疫后各试验组IFN-y和IL-18的变化情况.结果表明,疫苗免疫1周后,所有免疫组均能产生抗NDV的HI抗体,pV-SoptiHN和pVC-SoptiHN组最高,与其他组差异显著;pVC-SoptiHN和pVC-HN质粒免疫组IFN-γ和IL-18表达水平要略高于pV-SoptiHN和pV-HN质粒免疫组.攻毒结果显示,pV-SoptiHN与pVC-SoptiHN免疫组的死亡保护率均为71%,排毒检出率均为25%,而pV-HN和pVc-HN免疫组的保护率均为50%,排毒检出率分别为50%和44%,pVAX1、pVAX1-CpG和PBS对照组攻毒后的死亡率均为100%,排毒检出率均为100%,pV-SoptiHN与pVC-SoptiHN免疫组的排毒时间与其他5组相比有所缩短.以上结果表明,修饰后的HN基因可以诱导鸡产生更强烈的免疫反应,获得更好的保护效率.
위료평개기인수식대제고DNA역묘면역효과적영향,장NDV F48E9주HN기인진행밀마자우화화신호태체환,수식후적기인명명위SoptiHN,장HN화SoptiHN기인분별극륭지pVAX 1화함CpG-ODN자격서렬적재체pVAX 1-CpG중,공획득pV-SoptiHN、pVC-SoptiHN、pV-HN화pVC-HN 4충질립.장4충질립고사두기다점주사3주령SPF계,매지계200 μg,이PBS위비면역대조;일면후3주이상동적제량가강면역,이면후2주이103EID50NDV적F48E9강독주진행공독,계산발병솔、사망솔이급배독정황.시험기간매주채집혈청진행HI항체적검측,동시채집항응혈분리외주혈림파세포,분석면역후각시험조IFN-y화IL-18적변화정황.결과표명,역묘면역1주후,소유면역조균능산생항NDV적HI항체,pV-SoptiHN화pVC-SoptiHN조최고,여기타조차이현저;pVC-SoptiHN화pVC-HN질립면역조IFN-γ화IL-18표체수평요략고우pV-SoptiHN화pV-HN질립면역조.공독결과현시,pV-SoptiHN여pVC-SoptiHN면역조적사망보호솔균위71%,배독검출솔균위25%,이pV-HN화pVc-HN면역조적보호솔균위50%,배독검출솔분별위50%화44%,pVAX1、pVAX1-CpG화PBS대조조공독후적사망솔균위100%,배독검출솔균위100%,pV-SoptiHN여pVC-SoptiHN면역조적배독시간여기타5조상비유소축단.이상결과표명,수식후적HN기인가이유도계산생경강렬적면역반응,획득경호적보호효솔.